Tese de doutorado
Estudo das mutações germinativas nos genes de reparo e Epcam em pacientes com suspeita Síndrome de Lynch
Fecha
2018-01-29Autor
Pimenta, Celia Aparecida Marques [UNIFESP]
Institución
Resumen
Background: Lynch syndrome (SL) is the most common inherited colorectal
cancer (CRC) syndrome, representing 2 to 4% of all cases of CRC, because
presenting few polyps is also known as HNPCC (nonpolypoid
hereditary
colorectal cancer). Most subjects with SL have at least one pathogenic mutation
of the MMR (mismatch repair) genes MLH1, MSH2, MSH6 or PMS2.
Objectives: Evaluate patients with CRC and gastric cancer (GC) with suspicion
of SL by immunohistochemistry and sequencing of DNA repair genes, and
EPCAM. Patients and methods: We analyzed 116 medical records of patients
with CRC and GC related to SL with at least one of the Bethesda criteria, after
an interview with a patient and consultation with a geneticist. An
immunohistochemical test and a new generation sequencing (NGS) of repair
genes was performed to investigate the expression of the repair proteins,
EPCAM and BRAF. Results: Among the 116 patients, 95 were considered
eligible. The mean age at diagnosis of CRC or CG in women was 50.7 years
and in men 54.03. Regarding the tumor location, 40% presented tumor in the
right colon, 60% had a moderately differentiated histological grade.
Immunohistochemistry was performed to study the immunoexpression of the
repair proteins in 95 samples of tumors tissue and 75.6% had absence of
expression in at least 1 of the proteins. Among tumors with some mutations,
74% of the patients were younger than 50 years and 47% of the CRC were on
left colon. NGS was performed on 95 blood samples. The MLH1 gene had 13%
of pathogenic mutations, MSH2 7%, MSH6 5%, and EPCAM 1%. The number
of patients affected by some mutation corresponded to 30% (29/95).
Conclusion: The MLH1 gene mutation was the most frequent. The percentage
of pathogenic mutations of the EPCAM gene was very rare. Approximately 50%
of the patients with absence of expression of the repair genes presented
pathogenic mutation at sequencing. This difference reinforces the importance of
the sequencing study among patients with altered expression of repair proteins. Introdução. A síndrome de Lynch (SL) é a síndrome de câncer colorretal
(CCR) hereditária mais comum, compreendendo 2 a 4% de todos os casos de
CCR e, por apresentar poucos pólipos também é conhecida por HNPCC (câncer
colorretal hereditário não polipoide). A maioria dos indivíduos com SL possui
pelo menos uma mutação germinativa patogênica dos genes MMR (mismatch
repair/reparo de emparelhamento) MLH1, MSH2, MSH6 ou PMS2. Objetivos:
Avaliar pacientes portadores de câncer colorretal e gástrico (CG) com suspeita
de SL por meio de imunohistoquímica e sequenciamento dos genes de reparo
do DNA, e EPCAM. Casuística e Método: Foram analisados 116 prontuários de
pacientes com CCR e CG relacionados a SL e que preenchiam pelo um dos
critérios de Bethesda, após entrevista com paciente e consulta com geneticista.
Foi realizado teste imunohistoquímico para pesquisa de expressão das proteínas
de reparo e também sequenciamento de nova geração (NGS) dos genes de
reparo, EPCAM e BRAF para pesquisa de mutações. Resultados: Entre os 116
pacientes, 95 foram considerados elegíveis. A média de idade ao diagnóstico de
CCR ou CG nas mulheres foi de 50,7 anos e nos homens 54,03. Quanto a
localização tumoral, 40% apresentaram tumor no cólon direito, 60%
apresentaram grau histológico moderadamente diferenciado. Foi realizada a
imunohistoquímica para estudo da imunoexpressão das proteínas de reparo em
95 amostras de tecido tumoral e 75,6% dos tumores apresentaram ausência de
expressão em pelo menos 1 das proteínas. Entre os tumores com alguma
mutação, 74% dos pacientes apresentaram idade inferior a 50 anos e 47% dos
tumores colorretais eram de cólon esquerdo. O NGS foi realizado em 95
amostras de sangue. O gene MLH1 apresentou 13% de mutações patogênicas,
o MSH2 7%, MSH6 5%, e o EPCAM 1%. O número de pacientes afetados por
alguma mutação correspondeu a 27% (26/95). Conclusão: O gene MLH1 foi o
que mais apresentou mutação patogênica sem relação com BRAF. O percentual
de mutações patogênicas do gene EPCAM foi muito baixo. Aproximadamente
50% dos pacientes com ausência de expressão dos genes de reparo
apresentaram mutação patogênica ao sequenciamento. Esta diferença reforça a
importância do estudo de sequenciamento entre os pacientes com alteração na
expressão das proteínas de reparo.