Vacinação de camundongos BALB/c com o gene da GP43 de Paracoccidioides brasiliensis: estudo da resposta imune

Abstract

Acidos nucleicos tem sido utilizados como a terceira geracao de vacinas, e tem sido utilizados em ensaios de imunoprotecao contra infeccoes virais, bacterianas e parasitarias. Resultados previos mostraram que a imunizacao com a gp43 nativa ou com um peptideo de 15 aminoacidos (P1O) contido neste antigeno protegeu camundongos contra o desafio de leveduras virulentas de P. brasiliensis. Para determinar se similar imunidade protetora poderia ser conseguida pela imunizacao com DNA, a ORF da gp43 foi subclonada em um vetor de expressao para celulas de mamiferos denominado VR-1012 (Vical Inc.), criando assim o plasmideo VR-gp43. Grupos de camundongos BALB/c foram imunizados com lOOmg de VR-gp43 ou VR-1012, num total de 4 doses, com intervalos de 2 semanas, por 2 meses. A resposta humoral contra a gp43 aumentou durante a imunizacao com VR-gp43, sendo IgG1, IgG2a, IgG2b e IgE os principais isotipos produzidos. Resposta imune celular tambem foi induzida, como medido pela estimulacao in vitro com gp43 de celulas de linfonodos dos animais imunizados com VR-gp43, com alta producao de IL-2 e IFN-Y. Estes resultados sugerem que uma resposta imune celular mista THllTH2, modulada por IFN-Y, foi induzida pela imunizacao com DNA neste modelo murino. A imunidade induzida foi duradoura e capaz de proteger camundongos BALB/c infectados com leveduras virulentas de P. brasiliensis, levando a significante diminuicao dos UFCs nos pulmoes e' reducao ou nao disseminacao para baco e figado dos camundongos, quando comparado com os animais controles. Estes resultados indicam que a imunizacao genica e uma alternativa viavel para induzir imunidade protetora tambem contra infeccoes fungicas