Transaminases Alanina Aminotransferase (ALT) e Aspartato Aminotransferase (AST) como biomarcadores de toxicidade no caranguejo Cardisoma guanhumi: Utilidade no monitoramento de risco ambiental.

Abstract

Os biomarcadores têm sido utilizados como ferramentas preventivas na avaliação de riscos ambientais. O presente estudo teve como objetivo caracterizar as transaminases alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST) como biomarcadores de toxicidade usando caranguejo semiterrestre Cardisoma guanhumi . O cloranfenicol , um antibiótico de uso ilegal em aquiculturas no mundo , foi utilizado como agente indutor.As transaminases ALT e AST da hemolinfa de dez indivíduos foram quantificadas antes e após tratamento com cloranfenicol. Técnicas histoquímicas foram utilizadas para avaliação histopatológica do hepatopâncreas de C. guanhumi. Adicionalmente, foi feita uma investigação de possíveis alterações do perfil das proteínas majoritárias nahemolinfa de animais controle e tratados, através de eletroforese em gel desnaturado de poliacrilamida - SDS (SDS-PAGE). As análises histopatológicas demonstraram que o tratamento com cloranfenicol na dosage de 50 mg/Kg, promoveu danos no tecido hepatopâncreático, evidenciados pela grande vacuolização, aumento no diâmetro vacuolar e intensa atividade secretora. Um aumento de 10 vezes e 5 vezes nos níveis hemolinfáticos de ALT e AST, respectivamente, demonstra que o efeito tóxico do antibiótico pode ser detectado pela quantificação dos níveis hemolinfáticos de ALT e AST. A eletroforese de gel de poliacrilamida revelou uma alteração no perfil das proteínas presentes na hemolinfa, caracterizado principalmente por redução nas bandas de 120 KDa e 15 KDa e aumento na banda de 30 KDa. A validação das transaminases ALT e AST como biomarcadores de toxicidae em C. guanhumi amplia as perspectivas da utilização desses biomarcadores para avaliação dos riscos ambientais de outros antibióticos similares, usados em aquicultura.

Biomarkers have been used as preventive tools in environmental risk assessment. The present study aims to characterize the alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) as biomarkers of toxicity in the semi-terrestrial crab Cardisoma guanhumi. Chloramphenicol, an illegal antibiotic, used worldwide in aquaculture was used as a toxicity inductor. ALT and AST were quantified in hemolymph of ten individuals before and after treatment with chloramphenicol. Histochemical techniques were used for histopathological evaluation of the hepatopancreas of C. guanhumi. In addition, an investigation was made in changes to major proteins in the hemolymph control and treated animals using SDS-PAGE. Histopathological analysis showed that treatment with 50 mgIkg chloramphenicol at a dose of promoted hepatopancreatic damage , evidenced by extensive vacuolization , increase of vacuolar diameter and intense secretory activity. 10 times and 5 times in hemolymphatic AST and ALT were observed, respectively, demonstrating that toxic effect of the antibiotic can be detected by quantifying the hemolymphatic levels of those enzymas. SDS-PAGE revealed a change in proteins profile of the hemolymph, mainly characterized by reduction of 120 kDa and 15 kDa, as well as increased 30 kDa.Validation ALT and AST as biomarkers for toxicity in C. guanhumi broadens the perspectives of using those biomarkers for environmental risk assessment on other similar antibiotics, used in aquaculture.