Avaliação da potencial atividade antiinflamatória da sambucus australis cham. & schltdl, in vitro

Abstract

A inflamação é um processo de defesa do organismo que ocorre, geralmente, quando é agredido por algum patógenos ou fatores externos com sintomas característicos de dor, rubor e tumor e perda da função que ocorre quando o processo se cronifica. Para o tratamento das diferentes condições inflamatórias tem sido muito utilizado, como alternativa, as plantas medicinais devido, especialmente, aos importantes efeitos colaterais e acesso restrito das diversas drogas comercialmente disponíveis, como os Glicocorticoides (GCs) e os antiinflamatórios não esteroidais (AINEs). Nesse contexto, a Sambucus australis Cham. & Schltdl (Sa) é uma das plantas mais utilizadas pela população para tratar enfermidades inflamatórias, conforme mostrado em estudo recente, realizado em São Franscisco do Conde, por nosso grupo, entretanto, há poucas evidências científicas que fundamente o uso desta espécie. Neste sentido, o presente estudo teve como objetivo avaliar a potencial atividade antiinflamatória da Sambucus australis Cham. & Schltdl, in vitro. Para isto, em cultura de esplenócitos estimuladas com PWM foram avaliados os níveis de citocinas (ELISA) pró- inflamatórias, como IL-4, IL-5, IFN-y e a citocina regulatória IL-10, e a expressão do fator de transcrição NF-kB (RT-PCR). Além disso, realizamos ensaio de estabilização de membrana e dosamos óxido nítrico em culturas de macrófagos. O tratamento com extrato metanólico da Sa (EMSa) nas concentrações de 100, 50, 25 e 12,5 μg/mL diminuíram os níveis de IL-4(p<0,001), IL-5 (p<0,001) significativamente, e apenas a concentração de 100 μg/mL foi capaz de reduzir os níveis de IFN-y(p<0,001). Entretanto, a concentração de 100 μg/mL também foi capaz de aumentar os níveis de IL-10, e reduzir a expressão do NF-kB (p<0,01). Em cultura de macrófagos estimuladas com LPS, o tratamento com o EMSa nas diferentes concentrações (100, 50, 25 e 12,5 μg/mL) diminui os níveis de óxido nítrico. Além disso, essas concentrações do EMSa teve um efeito protetor em ensaio de estabilização de membrana de eritrócitos. Estes resultados sugerem que a Sambucus australis Cham. & Schltdl tem um potencial efeito antiinflamatório, in vitro, caracterizado pela redução das citocinas inflamatórias e da expressão do NF-kB, e aumento de IL-10.

Inflammation is process for body's defense that usually occurs when it is affected by some pathogens or external factors presenting characteristic symptoms such as pain, redness, tumor and loss of function that occurs when the process gets chronic. As alternative for the treatment of inflammatory conditions, the medicinal plants have been used for a long time as medicines especially due to the classical side effects and restricted access of various commercially available drugs such as esteroids (GCs) and nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDss). In this context, Sambucus australis (Sa) was one of most cited herb to treat inflammatory diseases in a recent study conducted in San Franscisco do Conde, by our group, however, little is known in scientific literature that support the use of this species. In this way, the present study aimed to evaluate the potential antiinflammatory activity of Sambucus australis, in vitro. We performed spleen cells culture stimulated with PWM in order to evaluate the production of proinflammatory cytokines (ELISA) such as IL-4, IL-5, IFN-y, and the regulatory cytokine IL-10 and expression of the transcription factor NF-kB (RT-PCR). In addition, we evaluated the levels of nitric oxide in macrophages cultures and the membrane stabilizing activity of S. australis methanolic extract (EMSa). The treatment with EMSa at the concentrations of 100, 50, 25 and 12.5 ug/ml decreased IL-4 (p<0.001) and IL-5 (p<0.001) levels, significantly, and only at 100 ug /ml was able to reduce IFN-у (p<0.001) levels. Moreover, at 100mg/mL EMSa was also able to increase IL-10 production and reduce NF-kB expression (p<0.01). In macrophages cultures stimulated with LPS, EMSa was able to reduce nitric oxide levels (p<0.001) in all concentrations tested (100, 50, 25 and 12.5 ug / mL). Additionally, EMSa had a protective effect on erythrocyte membrane stabilization assay. Taken together, these results suggest that Sambucus australis has a potential anti-inflammatory effect in vitro, characterized by the reduction of inflammatory cytokines and the expression of NF-kB and IL-10 up-regulation.