doctoralThesis
Estudo da imunoexpressão de proteínas envolvidas na transição epitélio-mesênquima em tumores de glândula salivar
Registro en:
SENA, Dáurea Adília Cóbe. Estudo da imunoexpressão de proteínas envolvidas na transição epitélio-mesênquima em tumores de glândula salivar. Orientador: Lélia Batista de Souza. 2022. 167f. Tese (Doutorado em Ciências Odontológicas) - Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2022.
Autor
Sena, Dáurea Adília Cóbe
Resumen
Salivary gland tumors (SGTs) present remarkable clinical and biological complexity; therefore,
many studies investigate the events involved in their progression. One of the dynamics involved
in the tumor invasion of different types of carcinomas is the epithelial-mesenchymal transition
(EMT). In this process, epithelial cells undergo a transition to a mobile mesenchymal state,
favoring invasion and metastasis. Therefore, this research analyzed the immunohistochemical
expression of E-cadherin, Twist1, Snail1, α-SMA, vimentin (VM) and matrix metalloproteinase
9 (MMP-9) in 90 SGTs cases; correlations among the biomarkers, as well as between the
biomarkers and clinicopathological parameters were made. We selected 20 cases of
pleomorphic adenoma (PA), 20 cases of mucoepidermoid carcinoma (MEC), 20 cases of
adenoid cystic carcinoma (ACC), 10 cases of polymorphous adenocarcinoma (PAC), 10 cases
of epithelial-myoepithelial carcinoma (EMC) and 10 cases of carcinoma ex-pleomorphic
adenoma (CXPA). E-cadherin, Twist1, and Snail1 were analyzed in tumor parenchyma,
observing the percentage of positive cells (PP) using scores ranging from 0 to 4, and the
expression intensity (EI), whose scores were ranged from 0 to 3. The evaluation of MMP-9 was
performed in tumor parenchyma and stroma, also evaluating PP and IE, both based on scores
that ranged from 0 to 3. The labeling for α-SMA and VM was analyzed in stromal cells. Positive
cells for α-SMA were counted in 10 fields and the mean was calculated. VM was evaluated
qualitatively, using 4 scores according to EI and whether the labeling was diffuse or focal.
Obtained data were analyzed using Statistical Package for Social Science, GraphPad Prism, and
STATA software. The significance level of 5% was adopted for the statistical tests. Patients
were mostly female, with a mean age of 49.8 years; the major salivary glands were the most
affected anatomical site, mainly the parotid gland. A lower E-cadherin immunostaining was
verified in PAs in comparison to malignant neoplasms of salivary glands (MNSGs). Low
immunoexpression of Twist1 and Snail1 was observed in PAs. Regarding the nuclear
expression of Twist1, it was found greater expression in malignant neoplasms than in PAs.
Furthermore, Twist1 in the nucleus was correlated with cytoplasmic expression of E-cadherin
in MNSGs. Regarding clinicopathological parameters, this protein was statistically related to
higher chances of death. Low immunoexpression of Snail1 was evidenced among the MNSGs.
However, in the analysis of CACs, greater nuclear expression was observed in the solid variant
compared to the others. Expression of MMP-9 in parenchyma showed a positive correlation
with cytoplasmic Twist1 and Snail1nuclear in MNSGs. MMP-9 also showed a positive
correlation when comparing its immunoexpression in the parenchyma and the stroma. VM was presented as a biomarker to be considered in the clinical evaluation of patients since it showed
a significant correlation between greater tumor size and a higher frequency of death.
Furthermore, the high expression of this protein appeared as an independent predictive factor
for worse overall survival (OS) rates. The evaluation of the rest of the clinicopathological
factors showed advanced clinical stages as an indicator of independent prognostic value for
lower rates of OS. For disease-free survival, these indicators were the location in the minor
salivary gland and the presence of distant metastasis. Our results suggest that the EMT may be
related to myoepithelial differentiation in PAs and tumor progression in MNSGs. Also, Twist1
and MMP-9 appear to play a greater role in the scenario of EMT in MNSGs; finally, VM might
be used as a prognostic value indicator. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Os tumores de glândula salivar (TGS) apresentam notável complexidade clínica e biológica,
razão para a qual muitos estudos investigam os eventos envolvidos na sua progressão. Uma
das dinâmicas envolvidas na invasão tumoral de diversos tipos de carcinomas é a transição
epitélio-mesênquima (TEM). Neste processo, as células epiteliais sofrem transição para um
estado mesenquimal móvel, favorecendo a invasão e metástase. Sendo assim, esta pesquisa
analisou a expressão imuno-histoquímica de E-caderina, Twist1, Snail1, α-SMA,
metaloproteinases de matriz 9 (MMP-9) e Vimentina (VM) em 90 casos de TGS,
correlacionando-os entre si e com parâmetros clinicopatológicos. Foram selecionados 20
casos de Adenoma pleomórfico (AP), 20 casos de Carcinoma mucoepidermoide (CME), 20
casos de Carcinoma adenoide cístico (CAC), 10 casos de Adenocarcinoma polimorfo (ACP),
10 casos de Carcinoma epitelial-mioepitelial (CEME) e 10 casos de Carcinoma ex-adenoma
pleomórfico (CexAP). A análise de E-caderina, Twist1, Snail1 foi realizada em parênquima
tumoral sendo observado o percentual de células positivas (PP), com escores variando de 0 a
4, e a intensidade de expressão (IE), cujos escores variaram de 0 a 3. A avaliação de MMP-9
foi realizada em parênquima e estroma tumoral, também avaliando-se a PP e a IE, ambos
baseados em escores que variaram de 0 a 3. A marcação para α-SMA e VM foi analisada em
região de estroma tumoral. Células positivas para α-SMA foram contabilizadas em 10 campos,
obtendo-se, então a média. A VM foi avaliada de forma qualitativa, utilizando-se 4 escores de
acordo com a IE e se a marcação é difusa ou focal. Os dados obtidos foram analisados no
software Statistical Package for Social Science, GraphPad Prism e STATA. O nível de
significância de 5% foi adotado para os testes estatísticos. Foi verificada menor
imunomarcação de E-caderina nos APs em relação às neoplasias malignas de glândula salivar
(NMGS). Observou-se baixa imunoexpressão de Twist1 e Snail1 em APs. Em relação a
expressão nuclear do Twist1, constatou-se maior expressão nas neoplasias malignas quando
comparadas aos APs. Ainda, Twist1 em núcleo foi correlacionado à expressão citoplasmática
de E-caderina nas NMGS. No que concerne aos parâmetros clinicopatológicos, esta proteína
se relacionou estatisticamente com maiores chances de óbito. Foi evidenciada baixa
imunoexpressão de Snail1 entre as NMGS. No entanto, na análise dos CACs, foi verificada
maior expressão nuclear na variante sólida em relação às demais. A expressão de MMP-9 em
parênquima demonstrou correlação positiva com Twist1 citoplasmático e Snail1nuclear nas
NMGS. A MMP-9 também apresentou correlação positiva na comparação da sua
imunoexpressão em região de parênquima e de estroma. A VM se apresentou como um biomarcador a ser considerado na avaliação clínica dos pacientes, já que esta apresentou
relação significativa com tamanho do tumor (T3-T4) e maior frequência de óbito. Ademais, a
alta expressão desta proteína se apresentou como um fator preditivo independente para piores
taxas de sobrevida global (SG). A avaliação dos demais fatores clinicopatológicos apresentou
estágios clínicos avançados como indicador de valor prognóstico independente para menores
taxas de SG, enquanto que para a sobrevida livre da doença, estes foram a localização em
glândula salivar menor e presença de metástase à distância. Os resultados deste estudo
sugerem que o processo de TEM pode estar relacionado ao estágio de diferenciação celular
em APs e à progressão tumoral nas NMGS. Ressalta-se, também, maior participação de
Twist1 e MMP-9 no cenário da TEM em tumores malignos de glândula salivar, além da
possibilidade de utilização da VM como indicador de valor prognóstico.