Dissertação (Mestrado)
Consequências da exposição embrionária à radiação ultravioleta-B em embriões e larvas de Macrobrachium olfersii
Autor
Freitas, Marina Cardoso de
Institución
Resumen
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2022. O aumento da incidência de radiação ultravioleta B (UVB) sobre a superfície terrestre está relacionado, entre outros fatores, com o aumento da emissão de poluentes na atmosfera e consequente diminuição da camada de ozônio. A energia da radiação UVB é conhecida por causar diferentes efeitos em organismos terrestres e aquáticos e é a mais danosa para os seres vivos. Nos ambientes aquáticos, a radiação UVB atinge adultos, larvas e embriões. A espécie do camarão de água doce, Macrobrachium olfersii é conhecida por habitar e se reproduzir em águas claras e rasas onde a radiação UVB penetra facilmente. As fêmeas possuem uma câmara incubadora externa e desprovida de carapaça ventral e, desta maneira os seus ovos estão expostos à radiação UVB durante o desenvolvimento embrionário. Considerando que os embriões são mais suscetíveis do que os adultos, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da exposição à radiação UVB em embriões e larvas de M. olfersii. Para tal, foi simulada a irradiação UVB (310 MW/cm-2) que os embriões recebem na época de reprodução. No 7º dia embrionário (E7), os embriões foram irradiados com lâmpada UVB 6 W durante 30 min. Após, os embriões foram coletados da câmara incubadora das fêmeas ovígeras para as análises no 10º dia embrionário (E10) e no primeiro dia após a eclosão da larva zoea (L1). Como controles foram utilizados embriões em E10 e larvas L1 não irradiadas. As análises foram dividas em: (i) proliferação celular dos embriões e larvas pela marcação da proteína fosfo-histona H3; (ii) morfometrias do olho e do comprimento das larvas e (iii) avaliar as respostas comportamentais à luz. Os resultados demonstraram diminuição significativa das células em proliferação em embriões (p <0,0001) e larvas (p < 0,001) no grupo irradiado com UVB. Quando avaliada a proliferação celular por regiões da larva, foi observada uma diminuição significativa na região do cefalotórax do grupo irradiado (p < 0,001). O índice do olho e o comprimento das larvas não diferiram significativamente entre os grupos. Nas análises de comportamento de fototropismo, as larvas do grupo controle reconheceram e migraram na direção da luz, enquanto as larvas do grupo irradiado permaneceram no escuro (p < 0,001). Com isso, sugere-se que o fototropismo pode ter sido prejudicado devido ao impacto da radiação UVB sobre o cefalotórax e olhos das larvas, pois os resultados da proliferação celular demonstraram que a região do abdômen não foi afetada, o que indica que a natação pode não ter sido perturbada. Estes resultados demonstram que a radiação UVB afetou a proliferação celular no desenvolvimento embrionário e larval, afetando principalmente a região anterior do embrião e da larva, além de alterar negativamente o comportamento de fototropismo das larvas, o que pode comprometer a sobrevivência desta espécie. Abstract: The increase in the incidence of ultraviolet B radiation (UVB) on the earth's surface is related, among other factors, to the increase in the emission of pollutants into the atmosphere and consequent decrease in the ozone layer. The energy of UVB radiation is known to cause different effects on terrestrial and aquatic organisms and is the most harmful to living beings. In aquatic environments, UVB radiation reaches adults, larvae and embryos. The freshwater shrimp, Macrobrachium olfersii, is known to inhabit and breed in clear, shallow waters where UVB radiation easily penetrates. Females have an external incubator chamber without a ventral carapace, so their eggs are exposed to UVB radiation during embryonic development. Considering the hypothesis that embryos and larvae are more susceptible than adults, the aim of this study was to investigate the effects of exposure to UVB radiation on M. olfersii embryos and larvae. For this, the UVB irradiation (310 MW/cm-2) that the embryos received during the breeding season was simulated. On the 7th embryonic day (E7) they were irradiated with a 6 W UVB lamp for 30 min. Afterwards, the embryos were collected from the brood pouch of the ovigerous females for analysis on the 10th embryonic day (E10) and on the first day after the hatching of the zoea larvae (L1). Non-irradiated E10 embryos and L1 larvae were used as controls. The analyzes were divided into: (i) cellular proliferation of embryos and larvae by labeling the phosphohistone H3 protein; (ii) larval eye and length morphometries and (iii)assess behavioral responses to light. The results showed a significant decrease in proliferating cells in embryos (p < 0.0001) and larvae (p < 0.001) in the UVBirradiated group. When evaluating cell proliferation by regions of the larva, a significant decrease was observed in the cephalothorax region of the irradiated group (p < 0.001). Eye index and larval length did not differ significantly between groups. In the phototropism behavior analysis, the larvae of the control group recognized and migrated towards the light, while the larvae of the irradiated group remained in the dark (p < 0.001). With this, it is suggested that phototropism may have be impaired due to the impact of UVB radiation on the cephalothorax and eyes of the larvae, as the results of cell proliferation showed that the abdomen region was not affected, which indicates that swimming cannot have been disturbed. These results demonstrate that UVB radiation affected cell proliferation in embryonic and larval development, mainly affecting the anterior region of the embryo and larva, in addition to negatively altering the phototropism behavior of the larvae, which may compromise the survival of this species.