Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, affects around 7 million people worldwide. Currently, the only drug available for treatment in Brazil is benznidazole (BZ), which has several limitations and adverse effects. The known in vitro trypanocidal activity of diamines, their supposed mechanism of action on polyamine biosynthesis, and the ease of their chemical synthesis encourage investigation of their in vivo efficacy. The objective of this work was to evaluate the effect of synthetic ethanediamine GIB24 against T. cruzi (Y strain). First, the in vitro effect against intracellular amastigote forms of T. cruzi was evaluated, whose IC50 value was less than 0.5 μM, which is 20 times more potent than BZ (IC50 = 11.4 μM). GIB24 was not cytotoxic to Vero E6 cells in active concentrations, being at least 180 times more toxic to the parasite than to the host cell (SI>180). To determine an optimal dose of GIB24 (in vivo I), BALB/c mice were infected i.p. with 104 T. cruzi blood trypomastigotes. Five days later, the 5 experimental groups were treated once a day orally (gavage) for 5 consecutive days with: GIB24 100, 50 and 20 mg / kg / day, benznidazole 100 mg/kg/day and vehicle (DMSO 5%). Based on the reduction in parasitemia, a dose of 50 mg/kg was defined for subsequent trials. To assess the trypanocidal efficacy of GIB24 (in vivo II), three groups of infected male BALB/c mice were treated by gavage with GIB24 50 mg/kg/day, BZ 50 mg/kg/day or vehicle, for a period of up to 11 consecutive days with treatment starting on the 5th dpi. The activity of GIB24 was also evaluated, under the same conditions, in a group of female Swiss mice. In vivo toxicity was also evaluated with the same treatment regimens, in uninfected animals, through the analysis of behavioral changes, weight mass and serum markers (ALT, CK and urea). A group of unhandled animals (naive) was used as a control. Our results showed that GIB24 at 50 mg/kg did not suppress the parasitemia or prevent mortality in both female and male mice, contrary to what was observed in the in vivo I assay. Administration of GIB24 for periods longer than 5 days caused apathy, weight loss, mortality and increased serum ALT levels. The toxicity observed in vivo partially corroborates the predictive results observed in silico, where GIB24 was classified in class IV (not lethal, but potentially harmful), and LD50 of 700 mg/kg. Therefore, in vitro assays showed that GIB24 was more potent than BZ. However, it was innefective and toxic in mice treated longer than 5 days.A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, afeta cerca de 7 milhões de pessoas em todo o mundo. Atualmente, o único fármaco disponível para o tratamento no Brasil é o benzonidazol (BZ), que apresenta várias limitações e efeitos adversos. A conhecida atividade tripanocida in vitro das diaminas, seu suposto mecanismo de ação sobre a biossíntese de poliaminas e a facilidade de sua síntese química incentivam a investigação de sua eficácia in vivo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da etanodiamina GIB24 sintética contra T. cruzi (cepa Y). Inicialmente, foi avaliado o efeito in vitro contra formas amastigotas intracelulares de T. cruzi, cujo valor de CI50 foi menor que 0,5 μM, sendo 20 vezes mais potente que o BZ (CI50= 11,4 μM). GIB24 não foi citotóxico para células Vero E6, nas concentrações ativas, sendo pelo menos 180 vezes mais tóxico para o parasito do que para a célula hospedeira (IS>180). Para determinar a dose ideal de GIB24 (in vivo I), camundongos BALB/c fêmeas foram infectados i.p. com 104 tripomastigotas sanguíneos de T. cruzi e a partir do 5º dpi, os 5 diferentes grupos experimentais foram tratados uma vez ao dia pela via oral (gavagem) durante 5 dias consecutivos com: GIB24 100, 50 e 20 mg/kg/dia, benzonidazol 100 mg/kg/dia e veículo (DMSO 5%). Com base na redução da parasitemia, a dose de 50 mg/kg foi selecionada para os ensaios subsequentes. Para avaliar a eficácia tripanocida de GIB24 (in vivo II), três grupos de camundongos BALB/c machos infectados, foram tratados por gavagem com GIB24 50 mg/kg/dia, BZ 50 mg/kg/dia ou veículo, por um período de até 11 dias consecutivos com tratamento iniciado no 5º dpi. A atividade de GIB24 também foi avaliada, nas mesmas condições, em um grupo de camundongos Swiss fêmeas. A toxicidade in vivo também foi avaliada com os mesmos esquemas de tratamento, em animais não infectados, através da análise de alterações comportamentais, massa ponderal e marcadores séricos (ALT, CK e ureia). Um grupo de animais não manipulados (Naive) foi utilizado como controle. Nossos resultados mostraram que GIB24 a 50 mg/kg não suprimiu a parasitemia nem preveniu a mortalidade tanto em camundongos machos quanto fêmeas, ao contrário do observado no ensaio in vivo I. A administração de GIB24 por períodos superiores a 5 dias causou apatia, perda de peso, mortalidade e aumento dos níveis séricos de ALT. A toxicidade observada in vivo corrobora parcialmente com os resultados preditivos in silico, com GIB24 inserida na classe IV (não letal, mas potencialmente nociva) e DL50 de 700 mg/Kg. Portanto, os ensaios in vitro demonstraram que GIB24 foi mais potente que o BZ. Porém, nas condições experimentais avaliadas, não apresentou atividade tripanocida in vivo e foi tóxica em tratamento superior a 5 dias.