Efecto de la IL-4 porcina recombinante (aprIL-4) producida en Escherichia coli sobre la inducción de células dendríticas derivadas de monocitos en un cultivo in vitro
Registro en:
instname:Pontificia Universidad Javeriana
reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana
Autor
González Pinzón, Laura Daniela
Institución
Resumen
Las células dendríticas (CD), son las principales células presentadoras antigénicas, por su capacidad de capturar, procesar y presentar antígenos de forma óptima. El conocimiento de las propiedades inmunomoduladoras podría conducir a mejoras en el campo de la inmunoterapia y de la vacunación porcina. Sin embargo, el estudio de estas células es limitado debido a las bajas concentraciones de población en la sangre y en los tejidos, por tanto, la derivación in vitro a partir de monocitos es un enfoque alternativo para examinar las propiedades y funciones biológicas de las células dendríticas porcinas. Uno de los métodos de generación in vitro es a partir de interleucinas, específicamente IL-4 la cuál trabaja en conjunto con el factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos (GM-CSF), con el fin de promover y estimular la proliferación y diferenciación a células dendríticas a partir de monocitos.
Dentro del marco de lo anterior, en este trabajo se obtuvo una concentración de proteína recombinante IL-4 de 157 µg/mL, expresada en Escherichia coli rosetta BL21 (DE3). Posteriormente, se evaluó la proteína en la diferenciación de células dendríticas a partir monocitos con tres concentraciones de IL-4 y GM-CSF, las cuales fueron evaluadas previamente en literatura. Se analizaron los cambios morfológicos de las células durante cuatro días y se evaluó la expresión de marcadores de superficie celular empleando anticuerpos monoclonales contra CD14 y MHC II por medio de citometría de flujo.