RESUMEN: Las malformaciones craneofaciales son los defectos congénitos más comunes en humanos. Dentro de estas, las hendiduras orofaciales del labio y/o el paladar son las más frecuentes y generan morbilidad considerable en los niños afectados, quienes deben someterse desde edades muy tempranas a múltiples intervenciones para su tratamiento y rehabilitación, entre las que se encuentran los injertos óseos, que aún se consideran el gold estándar para la reparación y regeneración ósea. Sin embargo, estos presentan varias desventajas, y genera comorbilidades en los pacientes. Las terapias avanzadas buscan alternativas de tratamiento para la regeneración de los tejidos, como el enfoque que ofrecen los modelos de cultivo tridimensional basados en células, al considerarse que representan el microambiente de los tejidos. Así mismo, buscan nuevas fuentes de células diferentes a las células madre mesenquimales, por las limitaciones ampliamente descritas para su uso in vivo. Esta tesis se enfoca en caracterizar células autólogas provenientes de la mucosa masticatoria de individuos con labio y/o paladar hendido no sindrómico, en un ambiente de cultivo celular en monocapa, y en cultivo tridimensional libre de factores externos o inductores químicos, además de analizar los cambios en la expresión génica resultado de la reprogramación vía biomecánica a la cual se someten las células con el propósito de evaluar su potencial uso en enfoques de ingeniería de tejidos y/o terapia celular para la reconstrucción de tejidos craneofaciales. Adicionalmente, se estandariza un modelo tridimensional in vitro para el estudio de la biología celular de los tejidos orofaciales.ABSTRACT: Craniofacial malformations are the most common congenital defects in humans. Among these, orofacial clefts of the lip and/or palate are the most frequent and generate considerable morbidity in affected children, who must undergo multiple interventions from very early stages to its treatment and rehabilitation, among which are bone grafts, which are still considered the gold standard for bone repair and regeneration. However, these have several disadvantages and generate comorbidities in patients. Advanced therapies seek treatment alternatives for tissue regeneration, such as the approach offered by three-dimensional cell-based culture models, as they are considered to represent the microenvironment of tissues. Likewise, they seek new sources of cells other than mesenchymal stem cells, due to the widely described limitations for their use in vivo. This thesis focuses on the characterization of autologous cells from the masticatory mucosa of individuals with non-syndromic cleft lip and/or palate, in a monolayer cell culture environment, and in three-dimensional culture free of external factors or chemical inducers, in addition to analyzing the changes in gene expression resulting from the reprogramming via biomechanics to which the cells are subjected in order to evaluate its potential use in tissue engineering and/or cell therapy approaches for craniofacial tissue reconstruction. Additionally, a three-dimensional in vitro model is standardized for the study of the cell biology of orofacial tissues.