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Caracterización de las regiones organizadoras nucleolares coloreadas con plata (AgNORs) en tumores cutáneos caninos
Nucleolar organized regions in canine cutaneos tumors
Registration in:
Giraldo GE, Aranzazu DA, Rodríguez BJ, Pérez MM, Ramírez MC. Caracterización de las regiones organizadoras nucleolares coloreadas con plata (AgNORs) en tumores cutáneos caninos. Rev. colomb. cienc. pecu. 2003;16(2):132–138.
0120-0690
2256-2958
Author
Giraldo Mejía, Gloria Eugenia
Aranzazu Taborda, Diego Alfonso
Rodríguez, Berardo de Jesús
Pérez, Mónica M.
Ramírez Rojas, María Consuelo
Institutions
Abstract
ABSTRACT: A silver stain technique is used to identify the Nucleolar Organizer Regions (AgNORs).
Nowadays, the quantitative and qualitative evaluation of these regions is a marker to the
proliferative activity in tumor cells. The purpose of this study was to characterize AgNORs in some
kind of canine skin tumors. There where evaluated 28 mast cells tumors, 18 squamous cells tumors
and seven basal cells tumors from the animal pathology archive and from the veterinarian clinic
of the University of Antioquia as well as other locals clinic in the city of Medellín, Colombia. The
samples were embedded in paraffin and cutted to four microns and stained with Hematoxylin-
Eosin to check the diagnostic and Giemsa stained to classify the mast cells tumors. To evaluate
morphometrically the AgNORs in the automatic image analyzer (AIA) other series of these samples
were stained with silver nitrate. The following parameters were evaluated: nuclear area, AgNORs
area/cell, AgNORs number/cell, and AgNORs distribution in the cell. The study of the variation
from the innestability of the average values was used in direct relation with sample size in order to
determinate the number of cells to be evaluated; yielding a total of 20 cells in each case for the
mast cell tumors and for the squamous cell tumors, moreover a total of 30 cells in each case for the
basal cell tumors. The data was statistically anallyzed using the variance analysis and by comparing
the medians by the Fischer (F) test, revealing significant level of p<0.05 value. The AgNORs stain
is viable in the evaluated tumors for what 30 minutes were needed for the incubation period. The
statistical significant analysis (p<0.05) shows that the grade II mast cell tumors have a smaller
nuclear area. Furthermore it shows significant difference (p>0.05) in the number and the area of
the AgNORs between the three histopathological levels of this tumor. The stained AgNORs revealed
two cellular layers in the mast cell tumors that differ from the grade classification that is used
today. RESUMEN: Se utiliza una técnica de coloración con plata para visualizar las Regiones Organizadoras
Nucleolares (AgNORs). La evaluación cuantitativa y cualitativa de estas regiones representa en la
actualidad un marcador de actividad proliferativa en células tumorales. El presente estudio tuvo
como objetivo caracterizar las AgNORs en algunos tipos de tumores cutáneos caninos, para lo cual se
evaluaron 28 mastocitomas, 18 carcinomas espinocelulares y siete epiteliomas basocelulares,
procedentes del archivo de Patología Animal y del Consultorio Veterinario de la Universidad de
Antioquia, y de otros consultorios de la ciudad de Medellín, Colombia. Las muestras bloqueadas en
parafina se cortaron a cuatro micras, y se colorearon con Hematoxilina-Eosina y Giemsa para
diagnosticar y clasificar los mastocitomas. Se utilizó otra serie de cortes coloreados con plata para
evaluar morfométricamente las AgNORs utilizando un Sistema Automático Analizador de Imágenes
(SAAI). Se evaluaron los parámetros: área nuclear, área AgNORs/célula, número de AgNORs/ célula,
y distribución AgNORs en la célula. Para determinar el número de células a evaluar se utilizó el
estudio de variación de la inestabilidad de los valores medios, con relación al tamaño de la muestra;
se obtuvo un mínimo representativo de 20 células por caso para los mastocitomas y los carcinomas
espinocelulares, y de 30 células por caso, para los tumores basocelulares. Los datos fueron analizados
estadísticamente mediante el análisis de varianza (ANOVA) y se compararon las medias por el test de
Fischer (F) empleando un nivel de significancia de p<0.05. La coloración AgNORs fue factible en los
tumores evaluados para lo cual se necesitaron de 30 minutos en el período de incubación. El análisis
estadístico mostró que los mastocitomas grado II poseen un área nuclear menor estadísticamente
significativa (p<0.05). Existe además, diferencia estadística significativa (p<0.05) en el número y en
el área de las AgNORs entre los tres grados histopatológicos de este tumor. La coloración de AgNORs
reveló dos poblaciones celulares en los mastocitomas, que difieren con la clasificación gradativa
utilizada en la actualidad. COL0001262