Fish produce sounds that are usually species-specific and associated with particular behaviors and contexts. Acoustic characterization enables the use of sounds as natural acoustic labels for species identification. Males of Prochilodus magdalenae produce mating sounds. We characterized  these sounds and tested their use in natural habitats, to use passive acoustic monitoring for spawning ground identification. We identified two types of acoustic signals: simple pulses and pulse trains. Simple pulses were 13.7 ms long, with peak frequency of 365 Hz, whereas pulse train were 2.3 s long, had peak frequency of 399 Hz, 48.6 pulses and its pulses lasted 12.2 ms, with interpulse interval of 49.0 ms long and 22.3 Hz pulse rate. We did not detect spawning in  absence of male calls nor differences in male sounds at different female densities. We found differences in train duration, pulse rate, and pulse duration in trains, according to the fish's source sites, but these sites were not well discriminated based on bioacoustical variables. In rivers, we located two P. magdalenae spawning grounds and recognized calls from another fish species (Megaleporinus muyscorum). We did not find a significant relationship between fish size and call peak frequency for P. magdalenae.Los peces producen sonidos que generalmente están asociados con comportamientos y contextos particulares y son especie-específicos. Su caracterización permite usarlos como etiquetas acústicas naturales para identificar especies. Los machos de Prochilodus magdalenae emiten sonidos de apareamiento. Caracterizamos estas señales acústicas y probamos su uso en hábitats naturales, para utilizar el monitoreo acústico pasivo para la identificación de zonas de desove. Identificamos dos tipos de señales acústicas: pulsos simples y trenes de pulsos. Los pulsos simples tuvieron una duración de 13.7 ms y frecuencia pico de 365 Hz, mientras que los trenes de pulsos duraron 2.3 s,  frecuencia pico de 399 Hz, 48.6 pulsos por tren, pulsos de 12.2 ms, intervalo interpulso de 49.0 ms y tasa de pulsos de 22.3 Hz. No detectamos desove en ausencia de sonidos de machos ni diferencias acústicas entre machos en parejas o en grupos de hembras. Dependiendo del origen de los machos, la duración del tren, frecuencia del pulso y duración del pulso en los trenes difirieron, pero los sitios no fueron bien discriminados basados en las variables bioacústicas. En ríos localizamos dos zonas de desove de P. magdalenae y pudimos distinguir sus sonidos respecto a los del pez Megaleporinus muyscorum. No encontramos una relación significativa entre el tamaño y la frecuencia pico para P. magdalenae.