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Establishment of the system of somatic embryogenesis in Azadirachta indica A. Juss from cell suspensions, coupled to the production of azadiractin in vitro
Establecimiento del sistema de embriogénesis somática en Azadirachta indica A. Juss a partir de suspensiones celulares, acoplado a la producción de azadiractina in vitro
Registro en:
10.54139/revinguc.v29i2.169
Autor
Fernández Da Silva, Rafael
Montilla, Valeria
Institución
Resumen
Neem (Azadirachta indica A. Juss; Meliaceae) is a woody tree versatile in medical, environmental and agricultural fields. In agriculture, its role is bioinsecticide, due to the secondary metabolite azadirachtin (AZA), only synthesized by this specie. To obtain the optimal concentration required a large amount of seeds, available for a short period of time per year, however, by techniques biotechnological, elite varieties coupled to a higher yield in the production of said compound can be obtained, regardless of the period of the year. Therefore, this study to establish the somatic embryogenesis system linked to the in vitro production of AZA in suspensions cells, from leaf and cotyledon, with different concentrations of cytokinin (BAP) and auxins (2,4-D and AIA) to regenerate plants and non-embryogenic callus, for the latter in liquid medium, to evaluate the effect of different proportions nitrate/ammonium, sodium acetate and squalene. Somatic embryos were differentiated in cell suspensions with 2 mg/L of BAP and 1 mg/L of 2,4-D, after 5 months of culture. The maximum production (52.53 mg/L) of AZA in 14 days of culture was achieved by simultaneously using nitrate (60 mM), sodium acetate and squalene (10 mg/L each). El neem (Azadirachta indica A. Juss; Meliaceae), es un árbol leñoso versátil en medicina, remediación y agricultura. En el agrícola, su rol es bioinsecticida, debido al metabolito secundario azadiractina (AZA), únicamente sintetizado por esta especie, cuya concentración óptima, requiere principalmente gran cantidad de semillas, disponibles por un breve lapso de tiempo al año, no obstante, por técnicas biotecnológicas, se puede obtener variedades elite acopladas a un mayor rendimiento en la producción de dicho compuesto, independientemente del periodo del año, por lo cual el objetivo de este trabajo fue establecer el sistema de embriogénesis somática concatenado a la producción in vitro de AZA en suspensiones celulares, a partir de hoja y cotiledón, con distintas concentraciones de citocinina (BAP) y auxinas (2,4–D y AIA) para regenerar plantas y callo no embriogénico, para de este último en medio líquido, evaluar el efecto de distintas proporciones de nitrato/amonio, acetato de sodio y escualeno. En suspensiones celulares se diferenciaron embriones somáticos con 2 mg/L de BAP y 1 mg/L de 2,4-D, luego de 5 meses de cultivo. La máxima producción (52,53 mg/L) de AZA en 14 días de cultivo, se logró empleando simultáneamente nitrato (60 mM), acetato de sodio y escualeno (10 mg/L c/u).