Mecanismos transducciónales de insulina en el cardiómiócito: papel del calció en la incorporación de glucosa

dc.contributorLavandero, Sergio
dc.contributorJaimovich, Enrique
dc.contributorUniversidad de Chile
dc.creatorContreras-Ferrat, Ariel Eduardo
dc.date2017-03-29T16:38:55Z
dc.date2022-08-18T00:43:34Z
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dc.date2013
dc.date2010
dc.date.accessioned2023-08-22T10:02:29Z
dc.date.available2023-08-22T10:02:29Z
dc.identifierhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/
dc.identifierhttps://hdl.handle.net/10533/180433
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8338412
dc.descriptionTanto los niveles intracelulares de Ca2+ ([Ca2+]¡) como el transporte de la glucosa son fundamentales para la fisiología del cardiomiocito, sin embargo, aún no se ha investigado la interrelación entre ambos eventos.En esta tesis se investigó si insulina regula los niveles [Ca2]¡ en el cardiomiocito, el mecanismo que participa y su papel en el transporte de glucosa vía GLUT4. Con este objetivo, cultivos primarios de cardiomiocitos de rata se preincubaron con la sonda fluorescente para Ca2+ FLUO3-AM y se visualizaron los cambios en los niveles de Ca2+ por microscopia confocal. Las vías transduccionales que regulan los movimientos intracelulares de Ca2+ se intervinieron selectivamente con inhibidores químicos y herramientas genéticas. La captación de glucosa se evaluó utilizando [3H]-2-desoxiglucosa y los niveles de GLUT4 en la superficie celular se cuantificaron encardiomiocitos no-permeabilizados transfectados con el plasmidio GLUT4-myc-eGFP.Los resultados mostraron que insulina indujo un rápido y transitorio aumento del [Ca2]¡ en dos componentes. Los bloqueadores del canal L de Ca2+ nifedipino y del canal/receptor intracelular ryanodina sólo previnieron el primer componente componente. El segundo componente se redujo con: a) inhibidores selectivos del receptor de inositol-1,4,5-trifosfato: xestospongina C y 2 amino-etoxidifenilborato (2APB), b) disminución de la masa del receptor de IP3 vía siRNA y e) por transducciónde un péptido inhibidor de señalización de las subunidades ?? de la proteína G (?ark).La captación de glucosa inducida por insulina fue prevenida por el quelante del Ca2+ intracelular BAPTA-AM, 2 APB y ?ark, pero no por nifedipino ni ryanodina. De manera similar, la exposición del GLUT4-myc-eGFP en la membrana celular inducida porinsulina fue inhibida por BAPTA-AM y xestospongina C, pero no por nifedipino. Sin embargo, este proceso también requirió la activación de PI3K y Akt para la segunda fase de liberación del [Ca2+]I y para la translocación del GLUT4. La transfección de un dominante negativo de PL3K? inhibió parcialmente la exposición de GLUT4-myc-eGFP.En conclusión, insulina aumentó los niveles de [Ca2+]i vía IP3R en cultivos primarios de cardiomiocitos, regulando la captación de glucosa vía GLUT4. Esta nueva vía de señalización de insulina podría influenciar al metabolismo cardiaco en el miocardio adulto y estar modificada en condiciones metabólicas como son la obesidad, resistenciaa insulina y diabetes.
dc.descriptionPFCHA-Becas
dc.descriptionDoctor en Bioquímica
dc.description104p.
dc.descriptionPFCHA-Becas
dc.descriptionTERMINADA
dc.formatapplication/pdf
dc.languagespa
dc.relationinstname: Conicyt
dc.relationreponame: Repositorio Digital RI2.0
dc.relationinstname: Conicyt
dc.relationreponame: Repositorio Digital RI2.0
dc.relationhandle/10533/108040
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/PFCHA-Becas/RI20
dc.relationinfo:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488
dc.rightsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.titleMecanismos transducciónales de insulina en el cardiómiócito: papel del calció en la incorporación de glucosa
dc.typeTesis Doctorado
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.typeTesis
dc.coverageSantiago


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