| dc.contributor | Saavedra-S, Claudia | |
| dc.contributor | Universidad Andrés Bello | |
| dc.creator | Morales-Sierra, Eduardo Hugo | |
| dc.date | 2017-04-06T21:24:18Z | |
| dc.date | 2022-08-19T20:18:05Z | |
| dc.date | 2017-04-06T21:24:18Z | |
| dc.date | 2022-08-19T20:18:05Z | |
| dc.date | 2015 | |
| dc.date | 2013 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T09:39:25Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T09:39:25Z | |
| dc.identifier | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/181693 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8337113 | |
| dc.description | Salmonella enterica serovar Typhimurium es una bacteria Gram-negativo,
anaerobio facultativo y patógeno intracelular que genera fiebre entérica en el modelo
murino. Una vez ingerida por vía oral atraviesa el intestino y es internalizada por las células
fagocíticas. En este lugar, es contenida en un fagosoma especializado denominado “vacuola
contenedora de Salmonella”, donde se encuentra con una serie de compuestos
antimicrobianos incluyendo las especies reactivas de oxígeno (ROS). Para sobrevivir, la
bacteria ha generado diversos mecanismos de defensa que incluyen modulación de la
producción de ROS, su degradación directa y cambios en la permeabilidad de su membrana
externa. En este contexto, la expresión de diversos genes que codifican porinas se ve
alterada en respuesta a ROS y adicionalmente presentan diversos sitios de unión para el
regulador global ArcA. Esto nos llevó a la hipótesis de que “El sistema de dos componentes
ArcAB detecta y responde a estrés oxidativo en Salmonella enterica serovar Typhimurium
y produce cambios en la expresión génica para su supervivencia”.
Mediante la medición de los niveles de transcrito de los genes ompD, ompW, ompS1
y ompS2 y ensayos de cambio en la movilidad electroforética se demostró que el sistema de
dos componentes ArcAB modulaba su expresión de manera directa en respuesta a ROS.
Una vez demostrado que el sistema participaba regulando la expresión génica en
estas condiciones, se evaluaron cambios transcripcionales globales mediante hibridación en
microarreglos. El análisis reveló que ArcA regula 58 genes en respuesta a H2O2 mientras
ArcB 68 y que la regulación de cada miembro del sistema es independiente entre sí. ArcA
regula la expresión de genes implicados en metabolismo central, síntesis de sideróforos,
glutatión y nucleótidos. Por su parte, el rol de ArcB se asocia principalmente con la regulación de la expresión de genes implicados en la biosíntesis de aminoácidos. Análisis
bioquímicos revelaron que ArcA es requerido para mantener un balance en los niveles de
NADH, el pool de glutatión y los niveles de ROS intracelulares.
Finalmente, la medición de los niveles de transcrito de arcA y arcB y de sus
productos génicos, además del uso de mutantes puntuales de la proteína ArcA y ArcB en
los residuos implicados en la transferencia del grupo fosfato permitieron identificar los
residuos necesarios para mediar la resistencia a H2O2 por cada uno de los miembros del sistema. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | Doctor en Biociencias Moleculares | |
| dc.description | 154p. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | TERMINADA | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | spa | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | handle/10533/108040 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement/PFCHA-Becas/RI20 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.title | Caracterización bióquímica y funciónal del sistema de dos componentes arcab de salmonella enterica serovar typhimurium en respuesta a condiciónes de estrés oxidativo | |
| dc.type | Tesis Doctorado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis | |
| dc.coverage | Santiago | |
