| dc.contributor | Neely, Alan | |
| dc.contributor | Hidalgo, Patricia | |
| dc.contributor | Universidad de Valparaíso | |
| dc.creator | González-Gutiérrez, Giovanni | |
| dc.date | 2017-03-28T16:30:32Z | |
| dc.date | 2022-08-18T03:47:53Z | |
| dc.date | 2017-03-28T16:30:32Z | |
| dc.date | 2022-08-18T03:47:53Z | |
| dc.date | 2007 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T04:17:27Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T04:17:27Z | |
| dc.identifier | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/180082 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8318908 | |
| dc.description | Los canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV) responden al voltaje de la
membrana abriendo o cerrando una puerta de activación que permite la entrada del calcio al
citoplasma. Los CCDVs están compuestos por varias subunidades tales como: Cavα1, β, δ2-δ y y,
de éstas, Cavα1 es la subunidad formadora del poro. La actividad de los CCDVs es regulada por
las diversas subunidades, siendo la Cavα1 la más potente. La Cavα1 aumenta la corriente
macroscópica de dos formas diferentes: favorece el tráfico de los canales hacia la membrana
plasmática y aumenta su probabilidad de apertura. Aunque varias de las funciones han sido
descritas sobre la estructura primaria de la Cavα1, no se conocen los elementos estructurales
responsables de las diversas características modulatorias de la Cavβ. Está bien establecido que la
Cavβ se une a una secuencia conservada intracelular llamada dominio de interacción de alfa
(AID). Aquí nosotros demostramos que el dominio de homología de Src de la subunidad β
interactúa con la dinamina, una proteína involucrada con la maquinaria endocítica de la célula, y
reduce el número de canales en la membrana plasmática. Esta reducción es promovida por la
Cavβ solamente cuando está desunida de la Cavβ 1. Por esto, además de la visión canónica que la
Cavβ promueve el tráfico hacia membrana, nosotros proponemos que la Cavβ remueve los
canales no funcionales de la superficie a través de endocitosis. Nosotros también demostramos
que la modulación de la actividad del canal por la Cavβ requiere un AID intacto, y que la
interacción α1-β es reversible con una constante de disociación cercana a 0.2-0.3 μM. Nosotros examinamos varias mutaciones puntuales sobre los residuos no conservados del AID que están mirando hacia el medio hidrofílico en el complejo Cavα1AID-β. Todas ellas decrecen la
probabilidad de apertura del canal entre 3-7 veces, mientras las constantes de disociación, medidas en condiciones in vivo, permanecen casi idénticas al canal silvestre. Aunque todas las mutantes analizadas retienen el comportamiento modal de la apertura, ellas mostraron grandes
diferencias en la fracción de tiempo residiendo en cada modo. Sin embargo, la apertura dentro de
cada modo permaneció incambiable. Estos resultados indican que los residuos no conservados del
AID interactúan con la maquinaria de apertura favoreciendo que los canales se abran. Y a que
estos cambios son solamente observados cuando la Cavβ está presente, nosotros proponemos que
una vez que la Cavβ se une al AID, es posible un contacto óptimo entre la región AID y la
maquinaria de apertura, y que este contacto promueve la entrada a los de apertura con mayor
probabilidad. Estos hallazgos abren una nueva visión de trabajo para entender el papel de la
Cavβ, no en la interacción directa de ella con la maquinaria de apertura, sino más bien en la
facilitación de interacciones intra-proteína con elementos de la subunidad formadora del poro. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | Doctor en Ciencias Mención en Neurociencia | |
| dc.description | 114p. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | TERMINADA | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | spa | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | handle/10533/108040 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement/PFCHA-Becas/RI20 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.title | Mecanismos de la modulación de los canales de calció dependientes de voltaje mediada por la subunidad reguladora beta | |
| dc.type | Tesis Doctorado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis | |
| dc.coverage | Valparaíso | |
