Efecto de la sobreexpresión de GAD-67 y GAD-65 en las propiedades inmunosupresoras de células madre mesenquimales murinas
Efecto de la sobreexpresión de gad-67 y gad-65 en las propiedades inmunosupresoras de células madre mesenquimales murinas
| dc.contributor | Fuentealba-Alday, Rodrigo Esteban | |
| dc.contributor | PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DE VALPARAISO | |
| dc.creator | Urrutia-Cabrera, Mariana Isabel | |
| dc.date | 2018-07-18T15:43:23Z | |
| dc.date | 2022-08-16T21:43:39Z | |
| dc.date | 2018-07-18T15:43:23Z | |
| dc.date | 2022-08-16T21:43:39Z | |
| dc.date | 2014 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T03:55:52Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T03:55:52Z | |
| dc.identifier | 1130482 | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/218768 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8317271 | |
| dc.description | Las células madre mesenquimales (MSC) se caracterizan por su capacidad de autorenovación y su potencial de diferenciación a diversos tipos celulares de origen mesenquimal, como osteoblastos, condrocitos y adipocitos. Estas células participan en un amplio rango de procesos fisiológicos y patológicos que incluyen: la mantención de la homeostasis celular, el envejecimiento y la regeneración tisular y, recientemente, se ha demostrado también son capaces de regular el sistema inmune. Las MSC exhiben características que les confieren tolerancia inmunológica y una fuerte capacidad inmunosupresora, inhibiendo la proliferación de células T, la presentación antigénica y la secreción de citoquinas por macrófagos. Estas respuestas son estrechamente dirigidas por el estado inflamatorio del microambiente al que se exponen y las citoquinas pro-inflamatorias IFN-γ, IL-1β y TNF-α juegan un papel esencial. Estudios recientes han situado al ácido γ-aminobutírico (GABA), principal neurotransmisor inhibitorio del sistema nervioso central, como un potente agente inmunosupresor y estudios preclínicos muestran efectos benéficos del tratamiento sistémico con GABA en modelos animales de enfermedades autoinmunes como la esclerosis múltiple, la artritis reumatoide y la diabetes de tipo 1. GABA es sintetizado a partir de L-Glutamato mediante la acción de la enzima ácido glutámico descarboxilasa (GAD). En mamíferos, existen dos isoformas, GAD-65 y GAD-67, que difieren en su peso molecular, la localización subcelular y el requerimiento de sus cofactores para la actividad catalítica. Nuestros hallazgos preliminares demuestran que las citoquinas pro-inflamatorias IFN-γ e IL-1β causan un aumento selectivo en los niveles de mRNA y proteína GAD-67, y potencian la actividad inmunosupresora de MSC in vitro. Nosotros hipotetizamos que la síntesis de GABA es uno de los mecanismos efectores para la inmunosupresión mediada por MSC. En el presente trabajo, nosotros realizamos ensayos de ganancia de función, en ausencia de estímulo inflamatorio, mediante la 8 sobreexpresión de GAD-65 y GAD-67 en MSC, y evaluamos su efecto en la inhibición de la proliferación de células T. Establecimos un protocolo de electroporación para la transfección de MSC, y medimos la proliferación de células T CD4+ en experimentos de co-cultivo a diferentes proporciones de linfocito:MSC. Sólo la co-expresión de GAD-67 y GAD-65 en forma conjunta aumentó las capacidades inmunosupresoras de MSC. Nuestros resultados demuestran que la sobreexpresión de GAD aumenta la inmunosupresión mediada por MSC, y sugieren un papel importante de GAD-65 en esta actividad. La secreción de GABA mediante la sobreexpresión de GAD-67/GAD-65 podría ser útil para modular las propiedades inmunosupresoras de MS | |
| dc.description | FONDECYT | |
| dc.description | FONDECYT | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement//1130482 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ | |
| dc.subject | Medicina y Ciencias de la Salud | |
| dc.subject | Medicina Clínica | |
| dc.subject | Reumatología | |
| dc.title | Efecto de la sobreexpresión de GAD-67 y GAD-65 en las propiedades inmunosupresoras de células madre mesenquimales murinas | |
| dc.title | Efecto de la sobreexpresión de gad-67 y gad-65 en las propiedades inmunosupresoras de células madre mesenquimales murinas | |
| dc.type | Tesis Pre-grado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/bachelorThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis |