| dc.contributor | GONZALEZ-CANALES, MAURICIO ALEJANDRO | |
| dc.contributor | UNIVERSIDAD DE CHILE | |
| dc.creator | REYES-JARA, ANGELICA SOFIA | |
| dc.date | 2016-08-10T20:07:16Z | |
| dc.date | 2022-08-16T18:23:47Z | |
| dc.date | 2016-08-10T20:07:16Z | |
| dc.date | 2022-08-16T18:23:47Z | |
| dc.date | 2007 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T02:24:20Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T02:24:20Z | |
| dc.identifier | D04I1257 | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/112261 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8310377 | |
| dc.description | El cobre (cu) es un micronutriente esencial para todos los sistemas biologicos debido a que un gran numero de proteinas dependen para su funcionamiento de uno o mas atomos de cu en su estructura. Sin embargo, en exceso el cu es toxico. Por tal motivo y con el proposito de asegurar un suministro adecuado de cu, los sistemas biologicos (procariontes y eucariontes) sintetizan una variedad de proteinas, que participan en el proceso de captacion, distribucion, almacenamiento y salida del metal. Si bien en eucariontes (uni y pluricelulares), existe un buen nivel de informacion sobre los componentes directamente involucrados en el metabolismo de cu, el conocimiento de los mecanismos que dan cuenta de su regulacion aun es parcial. De esta forma las ventajas que presentan organismos procariontes como modelos para evaluar aspectos basicos de la interaccion nutriente-gen se presenta como una alternativa novedosa y atractiva. Sin embargo, los estudios de bacterias y cu se han centrado en fenomenos de toxicidad y resistencia desde una perspectiva aplicada, sesgando la investigacion hacia la comprension de procesos que permiten el control de bacterias patogenas. La excepcion la constituye enterococcus hirae, donde se ha estudiado el funcioamiento y regulacion del operon cop, encargado de mantener los niveles de cu intracelular. A la fecha, el genoma de e. Hirae no ha sido secuenciado lo cual limita la comprension de la homeostasis de este metal al menos en cuatro aspectos: 1) el operon cop no codifica para proteinas involucradas en el almacenamiento del metal; 2) no es posible determinar el numero y tipo de proteinas que requieren de cu para su actividad; 3) se desconoce si existen paralogos de los genes codificados en el operon cop y 4) si la funcion del operon cop puede ser complementadaño asumida por otras proteinas de la bacteria. En base a estos antecedentes consideramos que entrerococcus faecalis, posee una importante ventaja para el estudio de la regulacion del manejo de cu, puesto que es la especie filogeneticamente mas cercana a e. Hirae de genoma conocido, que ademas posee en su genoma un operon del tipo cop. En base a estos antecedentes, en este proyecto de tesis doctoral se propuso construir un modelo que permita responder interrogantes sobre el manejo y regulacion del contenido intracelular de cu en bacterias. Para ello se utilizo a e. Faecalis como modelo de estudio. La hipotesis de trabajo se centro en definir si la exposicion de e. Faecalis a cobre regula la expresion coordinada de genes del operon cop y de otros elementos asociados a la homeostasis de cobre, ubicados en un contexto diferente en el genoma bacterian. El siguiente grupo de objetivos fue considerado como prioritario al abordar esta hipotesis. 1. Determinar las respuestas en proliferacion de e. Faecalis frente a exposiciones variables de cu extracelular; 2. Validar la funcion del operaon copo de e. Faecalis en la homeostasis de cu; 3. Identificar la presencia de potenciales componentes codificados en el genoma de e. Faecalis que participen en el metabolismo de cu y que complementen la funcion del operon cop y 4. Evaluar cambios a nivel transcripcional de los potenciales genes asociados a la homeostasis de cu en respuesta exposicion al metal. Nuestros resultados indican: que la toxicidad mediada por exposicion a cu es dependiente del estado de oxidacion del metal; 2. Las proteinas codificadas en el operon cop de e. Faecalis son esenciales en la mantencion de los niveles intracelulares de cu en esta bacteria; 3. En e. Faecalis los cambios en la disponibilidad de cu inducen cambios en la expresion de diversos genes codificados en un contexto genomico diferente al del operon cop; 4. En e. Faecalis se activan al menos dos mecanismos de regulacion en respuesta a una exposicion a cu que dan cuenta de la mantencion de la homeostasis del metal en la celula silvestre; 5. En e. Faecalis la ausencia de la proteina copa genera un aumento de los niveles intracelulares de cu, lo que sugiere que esta proteina participa en la salida de cu; 6. El genoma de e. Faecalis codifica para proteinas atpasas que disminuyen su expresion en presencia de cu, las que podrian estar participando en la captacion de cu en esta bacteria; 7. Los genes del operon cop de e. Faecalis responden transcripcionalmente a cu y esta respuesta es regulada por copy. Asi mismo, es posible proponer la existencia de un segundo factor de transcripcion que regula la expresion del operon cop. | |
| dc.description | FONDEF | |
| dc.description | DR. NUTRICION | |
| dc.description | 20 | |
| dc.description | FONDEF | |
| dc.description | TERMINADA | |
| dc.language | spa | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement/Fondef/D04I1257 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | Atribución-NoComenrcial-SinDerivadas 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.title | Enterococcus faecalis un modelo para el estudio del manejo y regulación de cobre intracelular | |
| dc.type | Tesis Doctorado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
