| dc.contributor | Reyes-Martínez, Juan | |
| dc.contributor | Young-Anze, Manuel | |
| dc.contributor | Pontificia Universidad Católica de Valparaíso | |
| dc.creator | Acevedo-Gutiérrez, Cristián Andrés | |
| dc.date | 2017-03-23T20:41:29Z | |
| dc.date | 2022-08-19T03:18:33Z | |
| dc.date | 2017-03-23T20:41:29Z | |
| dc.date | 2022-08-19T03:18:33Z | |
| dc.date | 2008 | |
| dc.date | 2008 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T01:26:26Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T01:26:26Z | |
| dc.identifier | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ | |
| dc.identifier | 21050588 | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/178919 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8305857 | |
| dc.description | Las alteraciones del balance metabólico causan modificaciones en las emanaciones
orgánico-volátiles de la piel. Aunque esto se conoce a nivel del órgano piel, se desconocen
muchos de los aspectos celulares involucrados. En esta investigación, se propuso estudiar
cómo la fibrina y la senescencia afectaban el metabolismo orgánico-volátil de células de
dermis humana, encontrando variaciones que pueden ayudar a explicar los complejos
cambios, que suceden a nivel celular, cuando la piel envejece o cicatriza.
La hipótesis planteada en esta investigación fue: La senescencia de un cultivo primario de
células dérmicas altera la expresión de los compuestos orgánicos volátiles, pero el
confinamiento del cultivo senescente en un coágulo de fibrina devuelve el perfil de volátiles a
un estado pre-senescente, así como la capacidad de crecimiento celular de los cultivos
senescentes.
Las células (fibroblastos) fueron aisladas de dermis de prepucios de donantes jóvenes
sanos, y envejecidas por traspasos consecutivos hasta obtener >90% de células con
reacción positiva al marcador SA/í3-Gal (Senescence Associated / Beta-Galactosidase). A los
cultivos celulares se les determinó los perfiles volátiles utilizando cromatografía de gases con
microextracción en fase sólida. Los perfiles volátiles obtenidos se estudiaron con técnicas
quimiométricas, indicando que la senescencia afecta el metabolismo de los volátiles, y a su
vez, que los perfiles volátiles se correlacionan significativamente con la senescencia celular.
Diecisiete compuestos volátiles presentes en los cultivos fueron identificados con
espectrometría de masa y estándares químicos, y de estos, cuatro se asociaron
directamente al proceso de senescencia celular con un análisis bioinformático.
Células pre-senescentes y senescentes fueron inmovilizadas en coágulos de fibrina
mezclando soluciones de fibrinógeno y trombina. La inmovilización de fibroblastos en
coágulos de fibrina incrementó la biomasa viable en cultivos pre-senescentes y senescentes.
En cultivos senescentes, el crecimiento se detuvo luego de 24 horas de inmovilización. Las
células senescentes inmovilizadas en fibrina siguieron expresando reacción positiva al
marcador SA/-Gal, sin embargo, la intensidad citoquímica SAIÍ3-Gal decreció
significativamente. También se observaron cambios a nivel metabólico orgánico-volátil y
morfológico de las células senescentes inmovilizadas en coágulos de fibrina. Un análisis
estadístico multivanante de componentes principales permitió clasificar los perfiles volátiles
de células senescentes inmovilizadas en fibrina con perfiles pre-senescentes.
En conclusión, la fibrina induce cambios al fenotipo de fibroblastos senescentes humanos y
reestablece parcialmente la expresión del perfil orgánico-volátil. Estos efectos de la fibrina
abren nuevos caminos para entender y revertir parcialmente el fenómeno de senescencia en
fibroblastos humanos. Además, los cambios metabólicos a nivel orgánico-volátil que
experimentan las células, permitirían desarrollar nuevas metodologías no destructivas, para
el estudio y optimización de los cultivos celulares. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | Doctor en Biotecnología | |
| dc.description | 84p. | |
| dc.description | PFCHA-Becas | |
| dc.description | TERMINADA | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | spa | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | handle/10533/108040 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement/PFCHA-Becas/21050588 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.title | Compuestos volátiles orgánicos en cultivos primariós: efectos de senenscencia e inmovilización de células de piel. | |
| dc.type | Tesis Doctorado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis | |
| dc.coverage | Valparaíso | |
