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USO DE ANTICUERPOS MONOCLONALES PARA CARACTERIZAR TUMORES LINFOIDES AVIARES
USO DE ANTICUERPOS MONOCLONALES PARA CARACTERIZAR TUMORES LINFOIDES AVIARES
Registro en:
10.15381/rivep.v14i2.1616
Autor
Tasayco A., Richard
Rosadio A., Raúl
Icochea D’A., Eliana
Rivera G., Hermelinda
Institución
Resumen
Macroscopic and histological tests were compared with presence of cell marker tests to better differentiate between Marek’s Disease (MD) and Lymphoid Leukosis (LL) to improve the diagnosis criteria on avian lymphoid tumors. These tests were carried out on 40 laying hens affected with tumors from commercial farms on the North coast of Peru (Trujillo, Lima and Chincha). Initially, using macroscopic criteria (age and affected organ) it was determined that 60% (n=24) were affected from MD and the other 40% (n=16) from LL. Subsequently, presence of infiltrated pleomorphyc lymphocytes in histopathological tests (HP), was a criteria used to determine that 45% (n=18) of the tumors were caused by MD and the other 22 had histological characteristics corresponding to LL (presence of homogeneous lymphoblasts forming nodules). In this way, the direct immunofluorescence test (IF) using monoclonal antibodies (MoAb) that was developed to identify lymphocyte T markers (CD3+), confirmed that only 50% (9/18) of the animals histologicaly diagnosed with MD had transformed T cells. Similarly, the MoAb for lymphocyte B (Ig M+), detected that only 54.6% (12/22) had transformed cells corresponding to lymphocyte B. Surprisingly, in 12/40 hens with nodular lymphoid tumors neither cell T nor cell B markers could be identified and in 9/40 cell markers for both kinds of cell (T and B) were able to be identified in the tumors. Also, in 3/18 and 2/22 of the samples diagnosed histopathologicaly with MD and LL respectively, the presence for myelocites was found suggesting the presence of avian leukosis virus subgroup J. Kappa and McNemar statistic tests showed that for Marek’s Disease had low concordance between HP and IF (-0.045); however, both methods (HP and IF) had a reasonable rate of concordance (0.314) for lymphoid leukosis. It is, concluded that the immunofluorescence test using the cell markers detection for monoclonal antibodies allows a more exact and efficient differential diagnosis than the histopathological test on avian lymphoid tumors. However, the histopathological and the immunofluorescence test are not mutually replaceable. Con el objetivo de mejorar los criterios diagnósticos en tumores linfoides aviares, se compararon exámenes macroscópicos, histopatológicos y presencia de marcadores celulares para diferenciar enfermedad de Marek (EM) y leucosis linfoide (LL). Se utilizaron 40 gallinas ponedoras afectadas por tumores, procedentes de granjas comerciales de la costa del Perú (Trujillo, Lima y Chincha). Inicialmente, utilizando criterios macroscópicos (edad y órganos afectados), se determinó que el 60% (n=24) padecían de EM y las 16 restantes de LL. Posteriormente, la presencia de linfocitos infiltrantes pleomórficos en exámenes histopatológicos (HP) en estas mismas aves, fue usado como criterio para diagnosticar que el 45% (n=18) correspondían a EM y las 22 restantes tenían características histológicas correspondientes a LL (presencia de linfoblastos homogéneos formando nódulos). La prueba de inmunofluorescencia (IF) directa y utilizando anticuerpos monoclonales (AcMo) desarrollados para identificar marcadores de linfocitos T (CD3+), confirmó que solamente el 50% (9/18) de animales histológicamente diagnosticados como EM, contenían células T transformadas. Similarmente, el AcMo para linfocitos B (Ig M+) detectó que solamente el 54.6% (12/22) tenían células transformadas correspondientes a linfocitos B. Sorprendentemente, en 12/40 (30%) de las aves con tumores linfoides, no se logró identificar marcadores de células T ni de B y en 9/40 se logró identificar marcadores de ambas células (T y B) en los tumores. Por otro lado, en 3/18 y 2/22 de las muestras diagnosticadas histopatológicamente como EM y LL, respectivamente, microscópicamente se encontró, además, la presencia de mielocitos, sugiriendo la presencia del virus de leucosis aviar tipo J. Las pruebas estadísticas de Kappa y Mc Nemar mostraron que para la enfermedad de Marek, la concordancia es baja entre HP e IF (- 0.045); sin embargo, para leucosis linfoide, ambos métodos (HP e IF) presentan un índice regular de concordancia (0.314). Finalmente, se concluye que la inmunofluorescencia mediante la detección de marcadores celulares, usando anticuerpos monoclonales, permite un diagnóstico diferencial más preciso y es más eficiente que el examen histopatológico en tumores linfoides aviares; sin embargo, el examen histopatológico y la inmunofluorescencia no son mutuamente reemplazables.