| dc.description.abstract | Kalanchoe daigremontiana es una planta utilizada en la medicina tradicional para el
tratamiento de enfermedades respiratorias, inflamatorias y crónico degenerativas (cáncer).
Los extractos de la planta han demostrado la prescencia de: triterpenos, bufadienólidos,
esteroles, fenantrenos, flavonoides y ácidos grasos. La purificación de estos compuestos
requiere grandes cantidades de biomasa vegetal, por lo tanto, es necesario desarrollar un
sistema biotecnológico para su producción. Los cultivos en suspensión son sistemas que bajo
condiciones específicas, favorecen la biosíntesis de compuestos con alto valor agregado. Por
otra parte, la elicitación con diferentes compuestos como el ácido salicílico, permite el
incremento en la biosíntesis de metabolitos de interés. El objetivo del presente trabajo fue
estudiar el perfil fitoquímico de cultivos en suspensión de Kalanchoe daigremontiana. Se
obtuvieron plántulas in vitro, que se utilizaron como fuente de explante para inducir la
formación de células desdiferenciadas, en medio MS adicionado con BAP y 2,4-D.
Posteriormente, se establecieron los cultivos en suspensión, se obtuvo la cinética de
crecimiento celular y se identificaron 4 fases (adaptación, exponencial, estacionaria y muerte).
Se calcularon los parámetros cinéticos: μ= 0.36 d-1 y td= 2.81 días. Se analizó el aspecto de los
cultivos en suspensión, identificándose principalmente células circulares y alargadas. Se
realizaron extracciones metanólicas para el análisis e identificación de los compuestos
presentes en planta, plántula y cultivos celulares mediante CCF y HPLC. Se realizó el
fraccionamiento de los extractos, en columna abierta para identificar los compuestos
mayoritarios en los cultivos en suspensión. El primer fraccionamiento en un sistema de fase
normal se obtuvieron 93 fracciones, las fracciones 26 y 35 se analizaron por TLC y HPLC y
correspondieron al ácido ursólico y al β-sitosterol, en las fracciones 36 a 44 se identificaron
por HPLC y espectrometría de masas, ácidos grasos del grupo omega 3. En un segundo
fraccionamiento en un sistema de fase reversa, se obtuvieron 14 fracciones, de las cuales
permitió separar 2 compuestos e identificarlos por espectrometría de masas denominados EPA
(M-1) correspondiente al metiléster del ácido 5, 8, 11, 14, 17 eicosapentaenoico y al DHA (M-
1) correspondiente al metiléster del ácido 4, 7, 10, 13, 16, 19 decosahexaenoico. Mediante la
elicitación con ácido salicílico se logró estimular e incrementar la producción de compuestos
de tipo iridoides presentes en los cultivos en suspensión, disminuyendo por otro lado el
contenido de ácidos grasos. | |
