| dc.description.abstract | Las celulas epiteliales y neuronas se caracterizan por poseer la membrana
plasmática dividida en dos dominios distintos: apical y basolateral, y somatodendritico y
axonal, respectivamente. Esta característica les permite desarrollar funciones de
transporte, secrecion vectorial y transmision de señales que son criticas para la
sobrevivencia del organismo. En estas células polarizadas la destinación de proteínas
de membrana plasmática hacia los distintos dominios ocurre posterior a la síntesis en
retículo endoplásmico, en la red trans del Aparato de Golgi a después de la
internacionalizar desde la superficie celular en endosomas de segregación y/o de
reciclaje. La segregaci6n de proteínas en transportadores vesiculares o tubulares seria
mediada por señales de destinaci6n que se encontrarían, al menos para proteínas
basolaterales, dentro de la estructura proteica, en el dominio citoplasmático.
En el presente estudio se utiliza al LRP, una proteína miembro de la familia de
receptores del tipo del receptor de lipoproteínas de baja densidad o LDL-R, como un
modelo de estudio de determinantes moleculares de la regionalización de proteínas en
células polarizadas. LRP se localiza polarizadamente en células epiteliales y en
neuronas. Sobre la base de estos antecedentes hemos estudiado las señales de
destinaci6n y de endocitosis presentes en el dominio citos6lico del receptor, analizando
el papel de algunos motivos aminoacídicos, basados en tirosina y dileucinas. Se
determin6 la importancia que tienen cada uno de estos motivos, por si solos o dentro
del contexto aminoacídico en el que se encuentran, en la destinación final a la
membrana que tiene la proteína en células epiteliales (FRT y MDCK) y en neuronas de
hipocampo. Los estudios se realizaron mediante la transección de un mini receptor ya
generado, el cual imita la función y trafico de LRP. Ademas del mini receptor nativo, se
utiliz6 una batirla de mini receptores con distintas mutaciones puntuales en la mayor
parte de los aminoácidos presentes en el dominio citoplasmático que conforman los
posibles motivos implicados en la destinaci6n y/o segregaci6n basolateral de la
proteína. Los resultados indican que la tirosina 29, presente en el primer motivo NPxY,
es clave para la localizaci6n de LRP, tanto basolateral como somatodendritica en las
c6lulas estudiadas. Sorprendentemente la mutaci6n del motivo NPxY como APxY
result6 en un fenotipo de distribuci6n diferente al de NPxA, sugiriendo que la tirosina
podría ser parte de otra serial de destinaci6n distinta a NPxY. Otros motivos
aminoacídicos como la tirosina 63, dentro del contexto de un motivo Yxx+, y el motivo
dileucina distal también tienen una contribución en la información de destinaci0on final
de LRP. Por tanto, la informaci6n contenida dentro de la proteína estaría siendo
decodificada de manera similar por la maquinaria intracelular de los tipos celulares
estudiados.
Se estudi6 ademas la participaci6n de proteínas tales como el complejo
adaptador AP-1B y su subunidad pr-1B, de Sort/.ng Ivex+.n 17 que interactda con LRP, y
de la Proteína Quinasa D, que tendría una funcion en la destinaci6n basolateral de
proteínas de membrana en células MDCK. Los resultados muestran la participaci6n de
estas proteínas intracelulares y contribuyen al conocimiento de la maquinaria
intracelular que participa en el reconocimiento de las señales de destinacion de LRP,
tanto en celulas epiteliales como en neuronas de hipocampo | |
