| dc.description.abstract | El síndrome de Down (SD) es determinado por la presencia de una copia extra
del cromosoma 21. Se manifiesta a través de múltiples anomalías, siendo el
retardo mental la característica más sobresaliente. La condición resulta en
alteraciones en las propiedades eléctricas de membrana en neuronas fetales,
idénticas a las encontradas en la trisomía 16 murina (Ts16), un modelo animal
del SD. En efecto, neuronas derivadas de ganglio de la raíz dorsal (GRD)
exhiben una reducción en la amplitud máxima de corrientes de calcio activadas
por voltaje (Ica). inversamente, neuronas en cultivo de hipocampo de Ts16
muestran un aumento en su amplitud. El regulador de Calcineurina 1 (RCAN1)
se encuentra presente en el cromosoma 21 humano y 16 murino. Esta proteína
inhibe a calcineurina (CaN), la cual posee varios sustratos conocidos, entre
otros, los canales de calcio tipo L. Debido a que los animales Ts16 son
inviables, nuestro grupo ha establecido líneas celulares inmortalizadas de
corteza cerebral provenientes de estos ratones (llamadas CTb) también como
de ratones diploides (llamadas CNh). Tal como en SD, RCANI está sobre-expresado en las células CTb. Considerando lo anterior, decidimos explorar las
lca en las células CTb y CNh, mediante la técnica de patch clamp en célula
entera. Encontramos una corriente de calcio inmadura sensible a nifedipina. La
activación de estas corrientes ocurre a -40 mV en ambos tipos celulares. Las
células trisómicas exhibieron un aumento de 2,4 veces en la densidad máxima
de lca, un cambio de 15 mV hacia potenciales más despolarizados en la curva
de inactivación dependiente de voltaje, y un aumento en el movimiento total de
carga de aproximadamente 2,5 veces. Para elucidar el rol de RCANI
sobrexpresado en la condición trisómica, se transfectó con secuencias
interferentes específicas para RCANl (knockdown). Este procedimiento llevó la
densidad de las lc" a niveles similares a los encontrados en CNh- El cambio en
la curva de inactivación dependiente de voltaje en CTb fue revertida a niveles
comparables con CNh. También el knockdown de RCANI logró bajar el
movimiento total de carga en CTb, sugiriendo una correlación entre el nivel de
inactivación y el movimiento de carga. Más aun, la inhibición farmacológica de
CaN por Fk-506 en células CNh, produce un aumento en la densidad de 16,
incluso por sobre los valores de CTb. Sin embargo, la curva de inactivación
dependiente de voltaje en CNh, cambió solo parcialmente hacia potenciales
más despolarizados luego de la inhibición de CaN, no alcanzando los valores
de las células CTb. Estos resultados muestran un rol de RCAN 1 en la
regulación de los canales de calcio activados por voltaje vía regulación de la
compuerta de inactivación. Este mecanismo no es totalmente dependiente de
CaN. No obstante, esta fosfatasa juega un importante rol en la regulación de
estas corrientes regulando a los canales mediante otro mecanismo. Por lo tanto,
el knockdown de RCAN I revirtió las alteraciones en Is. descritas en CTb,
sugiriendo que la sobre-expresión de esta proteína altera la conductancia de
calcio a través de los canales activados por voltaje, asi comprometiendo
funciones neuronales críticas. Los mecanismos regulados por RCAN1 podrían
constituir posibles blancos terapéuticos en el SD | |
