Candida albicans, Enterococcus faecalis y Staphylococcus aureus son los microorganismos patógenos más comunes en humanos, se han asociado frecuentemente al fracaso del tratamiento endodóntico. En este trabajo se reporta la síntesis, caracterización y efectividad de una solución irrigante que contiene nanopartículas de plata (EDTA+AgNPs) (abreviada como AgE en el manuscrito), con propiedad quelante y antimicrobiana para el tratamiento de conductos radiculares. Las nanopartículas de plata (AgNPs) en el vehículo quelante fueron caracterizadas por espectroscopía UV-vis y microscopía electrónica de transmisión (TEM), las AgE mostraron una forma cuasi-esférica con un diámetro de 13.09 ± 8.05 nm y la solución control (Ag) registró un tamaño ligeramente mayor (15.80 ± 7.41). La caracterización de la actividad quelante de AgE se evaluó en dentina radicular con microscopía de fuerza atómica (AFM), microscopía electrónica de barrido (SEM), espectroscopía de absorción atómica (AAS), microdureza (MD), análisis estereoscópico y difracción de rayos X (XRD). Las muestras tratadas con diferentes concentraciones de AgNPs en el irrigante experimental registraron resultados similares al estándar de oro (EDTA al 17%) en 1 y 10 minutos. Aún más, las AgNPs mostraron entrar en el tejido a través de los túbulos dentinarios, reflejado en un cambio de la coloración y aumento de la microdureza. La actividad antimicrobiana se evaluó en células planctónicas y biopelículas de C. albicans y S. aureus, excepto por E. faecalis que fue sólo evaluado en células planctónicas. En C. albicans y S. aureus, la concentración mínima inhibitoria (CMI) y mínima microbicida (CMF/CMB) a las 24 h fue menor con AgE en células planctónicas, mientras que el control (Ag) registró valores más altos, sin embargo, la MBC para E. faecalis fue similar. Se obtuvo una CMI 50, 80 y 90 en biopelículas de C. albicans y S. aureus durante 1, 10 y 30 min, interesantemente un efecto sinérgico se observó en C. albicans, sin embargo, el desempeño de la solución control (Ag) fue mejor en S. aureus con altas concentraciones. Los análisis en microscopía confocal revelaron un daño de células en biopelículas maduras, estos resultados fueron confirmados en SEM, en el que también se observaron AgNPs (10-50nm) sobre la pared celular de los microorganismos. En resumen, el desarrollo de este novedoso irrgante con AgNPs pequeñas mostró tener actividad quelante y antimicrobiana para prevenir y controlar infecciones del tratamiento endCandida albicans, Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus are the most common pathogenic microorganisms in humans; they have often been associated in endodontic failures. Here we report the synthesis, characterization and effectiveness of an irrigant solution with silver nanoparticles (EDTA+AgNPs) (named AgE throughout the manuscript) with chelating and antimicrobial properties for root canal treatment. AgNPs of the chelating vehicle were characterized by UV-vis spectroscopy and transmission electron microscopy (TEM), AgE showed a quasi-spherical shape with size diameter of 13.09 ± 8.05 nm, whereas control (Ag) had a slightly bigger size diameter (15.80 ± 7.41). To characterize the chelation activity of the AgE, we evaluated the dentin treated with atomic force microscopy (AFM), scanning electron microscopy (SEM), atomic absorption spectroscopy (AAS), microhardness (MD), optical stereoscopy and X ray diffraction (XRD). Samples treated with the experimental irrigant at different concentration recorded similar results to the gold standard (17% EDTA) in 1 and 10 minutes. Moreover, the AgNPs showed entry into the tissue through dentinal tubules, expressed by a change of color on dentine and also an increased microhardness. The antimicrobial activity was performed with C. albicans and S. aureus on planktonic cells and biofilm, except E. faecalis that was only evaluated on planktonic cells. For C. albicans and S. aureus on planktonic cells, a less minimum inhibitory concentration (MIC) and microbicidal concentration (MBC/MFC) in 24 h were recorded with AgE, whereas for the control group (Ag) higher values were determined, however MBC was similar for E. faecalis. A MIC 50, 80 and 90 were obtained on biofilm during 1, 10 and 30 min of contact with AgE for C. albicans and S. aureus, interestingly a synergic effect was observed with C. albicans, yet a better performance was recorded on higher concentrations for the control (Ag) in S. aureus. Confocal microscopy analysis revealed damage on mature biofilm exposed to AgE. These results were confirmed with SEM, which also showed the presence of AgNPs (10-50 nm) on the cell wall. In summary, the development of this novel irrigant contains a small size of AgNPs and shows chelating and antimicrobial activity with promising capacity to prevent and control infections of endodontic treatments.