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Ingeniería de células cancerosas de mama para la sobreproducción de la proteína Smad7, un inhibidor del TFG-beta
Engineering breast cancer cells for the overproduction of the TGF beta protein inhibitor Smad7
Autor
ELVA ALEJANDRA GÁRATE CARRILLO
Institución
Resumen
Este trabajo tuvo como objetivo modificar genéticamente células de cáncer de mama MDA-MB-231 mediante un sistema lentiviral que permitiera la sobreexpresión de la proteína Smad7, un inhibidor negativo de la vía de señalización del TGFβ. Las células estables generadas sobreexpresaron el transcrito y la proteína Smad7. Al caracterizarlas, la expresión de PMEPA1, gen altamente regulado por TGFβ se vio disminuida. La tasa de proliferación se mantuvo sin cambios, no así el grado de migración comparado con células parentales. Además, presentaron una morfología distinta a la convencional, lo que sugiere que la sobreexpresión de Smad7 inhibe la vía del TGFβ posiblemente alterando y disminuyendo la agresividad y el potencial metastásico de las células de cáncer de mama. In this work, we generated stable MDA-MB-231 cells overexpressing the Smad7 protein, a negative regulator of TGFβ, using a lentiviral system as a gene transfer strategy. Overexpression of Smad7 mRNA was tested by RT-qPCR and at a protein level by Western blot. Smad7 overexpressed in the stable cells inhibited TGFβ signaling demonstrated by inhibition of PMEPA1 negative TGFβ regulated gene. The proliferation rate was not affected. However, the migration rate significantly decrease compared to the parental cancer cell line. Our results suggest that overexpression of the Smad7 protein inhibits the TGFβ signaling pathway, impairing the migration rate and altering the fibroblast like phenotype of breast cancer cells in-vitro.