| dc.contributor | Nicole Muriel Arraño Ulloa | |
| dc.contributor | Inversiones y Servicios Médicos del Sur Límitada | |
| dc.date | 2016-11-28 | |
| dc.date | 2021-07-16T04:50:13Z | |
| dc.date.accessioned | 2022-12-28T07:00:01Z | |
| dc.date.available | 2022-12-28T07:00:01Z | |
| dc.identifier | 17COTE-72437 | |
| dc.identifier | 2017-72437-INNOVA_PRODUCCION | |
| dc.identifier | http://repositoriodigital.corfo.cl:80/xmlui/handle/11373/173442 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/5885025 | |
| dc.description | 1. Establecer Protocolo de Colecta Conservación y Procesamiento de Muestras: se Establecerá un Sistema para Colecta y Traslado de la Muestras para lo cual se Diseñará un Kit que Permita la Conservación e Identificación Adecuada de Cada Muestra. La Colecta de la Muestra se Realizará una Vez que el Embrión Sea Retirado de la Gota de Cultivo por el Personal de la Empresa Contratante. Se Realizará en Paralelo un Experimento con un Modelo de Embriones Animales para Definir el Tiempo Máximo de Estabilidad de la Muestra y por Tanto el Tiempo Máximo de Traslado hasta la Unidad de I+d+i. Las Muestras se Enviarán Vía Correo Terrestre en Sistema Diseñado Según los Datos de Estabilidad. En este Objetivo se Considera el Diseño de un Software que Permita el Almacenaje Seguro de Todos los Datos. Todas las Muestras de Medio de Cultivo se Tomarán Previo Consentimiento Informado de los Pacientes. Importante Destacar que el Medio de Cultivo se Descarta en Cada Proceso y su Uso No Atenta contra la Viabilidad Embrionaria. | |
| dc.description | 2. Aislar y Caracterizar las Poblaciones de Mvs/exo Secretadas por los Embriones Individuales: Basado en la Experiencia Previa de la Unidad de I+d+i Así como los Resultados de Concentración y Estabilidad de la Muestra se Definirá un Protocolo de Aislamiento de Vesículas Partiendo por el Principio Básico de Centrifugaciones Seriadas y Ultracentrifugación. Las Muestras de Medio de Cultivo de Embriones Humanos Recibidas en el Laboratorio se Procesarán Según los Protocolos Establecidos en Puntos Anteriores. Las Características de las Poblaciones se Caracterizarán Teniendo en Cuenta Aspectos Cuantitativos (concentración y Talla) mediante Nta (nanoparticle Tracking Analysis) y Cualitativo (marcadores de Superficie: Cd9 Cd81 y Cd63) mediante Citometría de Flujo. | |
| dc.description | 3. Validar un Método No Invasivo Basado en el Análisis de las Poblaciones Mvs/exo para la Selección de Embriones Pre-implantatorios Competentes: se Realizará un Análisis Retrospectivo y Estadístico para Correlacionar la Competencia Embrionaria Medida en Términos de Desarrollo In Vitro hasta Estadio de Blastocisto Y/o el Desarrollo a Término y los Marcadores Cuantitativos de las Poblaciones de Vesículas Secretadas por Cada Embrión. Los Datos de Competencia Embrionaria Serán Suministrados por la Empresa Contratante a la Unidad de I+d+i. | |
| dc.description | 4. Validar el Uso de las Mvs/exo Secretadas por Embriones al Medio de Cultivo para el Diagnóstico Genético Pre-implantatorio: se Realizará un Análisis de Correlación para Validar el Uso de las Vesículas Secretadas por Cada Embrión para el Análisis Genético Pre-implantatorio. Se Comparará el Contenido de Adn en las Vesículas con los Datos Obtenidos mediante Análisis de Acgh a Partir de Biopsias Individuales. De Cada Embrión se Tomará una Biopsia Celular Así como el Medio de Cultivo. Los Embriones para este Objetivo se Producirán a Partir de Gametos de Donantes (según Protocolo de Empresa Contratante) y que se Conservarán Posteriormente por la Misma Empresa. Se Realizará Diagnóstico Genético Pre-implantatorio Basado Hibridación Genómica Comparativa mediante Microarreglo (acgh) para el Análisis del Total de Cromosomas Utilizando la Plataforma Surescan (agilent). Se Aislará el Adn de Mvs/exo de Embriones Individuales Utilizando Protocolos y Kits Comerciales y el Análisis de Adn se Realizará por Secuenciación. Finalmente se Realizará un Análisis de Correlación entre los Datos Obtenidos por Acgh y el Análisis Genómico de las Mvs/exo. Se Establecerán Criterios de Evaluación de la Metodología Propuesta en Base a Repetibilidad y Capacidad Predictiva de la Nueva Metodología. | |
| dc.description | 5. Generar un Ambiente Dinámico de Innovación al Interior de la Empresa Definiendo Nuevas Iniciativas y Promoviendo la Vinculación Ciencia-empresa mediante la Relación Constante con Entidades de I+d+i: durante la Ejecución del Proyecto en Conjunto entre la Entidad de I+d+i y la Empresa (a Través del Encargado de I+d+i) se Realizará un Diagnóstico de las Actuales Oportunidades de Investigación y Desarrollo en el Área que Generen Nuevos Proyectos de Investigación entre la Empresa y el Proveedor de I+d+i. Esto se Plasmará en un Plan de Acción que Deberán Coordinar entre las Dos Entidades para Concretar y Aprovechar las Oportunidades Previamente Identificadas. | |
| dc.description | Establecer un Sistema de Diagnóstico Pre-implantatorio No Invasivo Predictor de la Capacidad de Desarrollo a Término de Embriones Humanos y de sus Características Genéticas. | |
| dc.description | Este Proyecto Surge de la Necesidad de las Clínicas de Infertilidad de Seleccionar Embriones Producidos In Vitro con Mayor Probabilidad de Implantarse y Desarrollarse a Término. El Objetivo Principal es Establecer un Sistema de Diagnóstico Pre-implantatorio No Invasivo Predictor de la Capacidad de Desarrollo a Término de Embriones Humanos y de sus Características Genéticas Basado en el Estudio del Contenido del Medio de Cultivo de los Embriones Producidos In Vitro. La Infertilidad es un Problema con Impacto Significativo en la Salud Mental de los Pacientes. En Chile Existen 250 Mil Parejas que Sufren de Infertilidad 20 Mil Requieren Tratamientos de Alta Complejidad que Involucran la Producción de Embriones In Vitro: Fecundación In Vitro (fiv) Y/o Inyección Espermática Intracitoplasmática (icsi). Cada Año se Realizan 2 Mil Tratamientos de este Tipo en Chile. Sin Embargo la Competencia de los Embriones Producidos In Vitro es Reducida Debido a Problemas Genéticos Asociados con los Protocolos de Manejo de los Gametos In Vitro o Heredados a Partir de los Progenitores. La Competencia Embrionaria es Definida por la Capacidad de un Embrión de Dar Lugar a Nuevo Individuo Saludable. Los Embriones de Mayor Competencia Tienen Mayor Probabilidad de Implantarse y Producir Crías. Los Menos Competentes No se Implantan o Son Abortados en Diferentes Etapas de la Gestación. Su Uso Implica Mayor Número de Transferencia de Embriones/paciente Estrés Físico-mental de Éstos Máyores Gastos Económicos. La Selección de Embriones Competentes se Basa en Criterios No Invasivos que Incluyen su Evaluación Morfológica o Morfo-cinética. Los Resultados Actuales Muestran que Estos Métodos No Son Precisos y No Incrementan las Tasas de Éxito. La Calidad Embrionaria Real No Necesariamente se Refleja en su Morfología la cual No Predice Aberraciones Genéticas o Cromosómicas (aneuploidía) Éstas se Detectan mediante Diagnóstico Genético Pre-implantatorio (pgd). Actualmente el Pgd Puede Realizarse Por: Cariotipo Hibridación Fluorescente In Situ Pcr e Hibridación Genómica Comparativa mediante Microarreglo (acgh). Independientemente de la Técnica Todas Tienen en Común la Toma de Biopsia por Manipulación Directa de los Gametos o del Embrión para su Análisis Genético Siendo Invasivas y Pueden Reducir Significativamente la Calidad de Estos Embriones y por Tanto Comprometer el Éxito del Tratamiento. Por ello Surge la Necesidad de Desarrollar un Sistema No Invasivo de Predicción de Competencia Embrionaria y de Pgd que Garantice la Calidad Genética sin Afectar la Viabilidad del Embrión y que No se Base en Criterios Morfológicos como hasta el Momento se Hace. Los Embriones Son Sistemas Dinámicos en Contínua Comunicación con el Medio lo que Permite su Desarrollo y la Comunicación con el Ambiente Materno. Durante este Proceso Secretan Diversas Moléculas que Han Sido Ensayadas como Definidoras de su Competencia sin Resultados Significativos en la Selección Embrionaria. Recientemente se Han Identificado Microvesículas/exosomas (mv/exo) Secretadas por Embriones que Podrían Estar Relacionadas con la Comunicación Embrio-materna. Las Mv/exo Son Vesículas de Membrana Lipídica (diámetro 20-120 Nm) Secretadas por las Células a los Fluidos Corporales In Vivo e In Vitro a los Medios de Cultivo. La Función de las Mv/exo Depende de las Células de Origen Pudiendo Variar Incluso Dentro de las Mismas Células Dependiendo de su Estado de Diferenciación. las Mv/exo Llevan Consigo Proteínas Ácidos Nucleicos y Lípidos que Pueden Regular la Expresión Génica de las Células Receptoras que Pueden Estar en la Vecindad o Distantes Constituyendo una Nueva Forma de Señalización Celular. Los Embriones Producidos In Vitro Secretan Diferentes Poblaciones de Mv/exo al Medio de Cultivo Probablemente Dependiendo de la Competencia Embrionaria. Las Características de las Poblaciones de Mv/exo Expresadas en Descriptores Estadísticos de Talla (media y Moda del Diámetro) Concentración y Dispersión (distribución) de las Muestras Según Tamaño Podrían Correlacionarse con la Calidad y Competencia Embrionaria Ofreciendo un Método Cuantificable para su Selección. El Medio de Cultivo se Descarta una Vez que los Embriones Son Usados Pudiendo Ser una Fuente Valiosa de Información sobre el Estado de Cada Embrión. Este Enfoque No se ha Descrito Anteriormente por lo que Constituye un Elemento Novedoso Patentable y de Valor Agregado para su Futura Comercialización. Adicionalmente la Presencia de Ácidos Nucleicos en Estas Vesículas Representa una Oportunidad Única para el Estudio Genético de Estos Embriones sin Necesidad de Invadirlos para la Toma de Biopsia. En este Proyecto se Propone Realizar un Estudio Comparativo del Método Actual de Pgd (acgh) y la Información Genética Contenida en las Mv/exo Secretadas al Medio de Cultivo de Cada Embrión en Particular con el Objetivo de Validar el Uso de las Mv/exo como Método de Diagnóstico Genético No Invasivo para la Clínica Humana. | |
| dc.description | Corporación de Fomento de la Producción | |
| dc.title | Desarrollo de un Sistema de Predicción de Calidad y de Diagnóstico Genético Pre-implantatorio No Invasivo para Embriones Producidos In Vitro en la Clínica Humana | |
| dc.type | proyecto | |
