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CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA Y MOLECULAR DE CEPAS NATIVAS DE Bacillus thuringiensis Berliner TÓXICAS A Phthorimaea operculella (Zeller).
Autor
Goyo-Morillo, Yaritza
Méndez, N
Jiménez, M
Rodríguez, J-P
Resumen
The use of Bacillus thuringiensis as biological control has been poor in Venezuela and even has a bank of native strains with toxic potential on various insect pests but its evaluation has been partial. The objective of this work was to characterize morphologically and molecularly natives strains of Venezuela toxic of B. thuringiensis against P.operculella from the potato crop. The strains UCLABt- 01, UCLABt- 44, UCLABt- 64, UCLABt- 67, UCLABt- 202, UCLABt- 204. As control strain was used B. thuringiensis var. kurstaki (HD-1) were analyzed by studies of transmission for morphological characterization of the crystals were performed. For identification of genes cry1Ac did use the PCR technique using the primers CJ-1 y CJ-2,19. Identify the gene encoding the toxin against the insect. All strains showed parasporal inclusion of bipyramidal form, typical of patotipo I, a Lepidopteran toxic. The gene content analysis by PCR showed that all amplification profiles were obtained with specific primers for the gene cry Ac including positive control except UCLABt-64 strain. Gene content is not definitive by itself, the track recommends standardizing and others how to use initiators cry9A, cry 9B y cry 9C, cry 9A, cry 9B y cry9C, could indicate the presence of additional genes to those found cry. El uso de Bacillus thuringiensis como controlador biológico ha sido escaso en Venezuela y aunque se cuenta con un banco de cepas nativas con potencial tóxico sobre varios insectos plaga, su evaluación ha sido parcial. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar morfológica y molecularmente cepas nativas de Venezuela de B. thuringiensis tóxicas a P. operculella insecto que ataca al cultivo de papa. Para ello, los cristales de las cepas nativas UCLABt- 01, UCLABt- 44, UCLABt- 64, UCLABt- 67, UCLABt- 202, UCLABt- 204 y la cepa control de B. thuringiensis var. kurstaki (HD-1), se sometieron a estudios de microscopía de transmisión para su caracterización morfológica. Para la identificación de genes cry1Ac se utilizó la técnica de PCR usando los cebadores CJ-1 y CJ-2,19 con el fin de identificar las cepas portadoras del gen que codifica la toxina contra el insecto. Todas las cepas mostraron la inclusión parasporal de forma bipiramidal, típico del patotipo I y tóxicos a lepidóptero. El análisis del contenido génico mediante PCR demostró que todos los perfiles de amplificación se lograron con los cebadores específicos para el gen cry1Ac incluyendo el control positivo, excepto la cepa UCLABt-64. El contenido génico encontrado no es definitivo, por cuanto se recomienda seguir estandarizando y utilizar otros cebadores como los de cry9A, cry9B y cry9C que podrían indicar la presencia de genes cry adicionales a los encontrados.