The objective of this research is to determine the effect of melatonin on superoxide dismutase (SOD) in seminal plasma and sperm membrane integrity during storage at 16°C. Methodology: Boar seminal samples were taken between 7-18 months of age using manual technique of gloved hand extraction in Inversiones Porcinas C.A. The optimal samples were diluted and aliquoted: control (with diluent), vehicle control (diluent and ethanol), semen with melatonin (1.25 mM), aliquots being stored at 16ºC for subsequent evaluation at day 0 and 1 of the preparation. The enzymatic activity of SOD (commercial kit Cayman®) and membrane integrity (hypo-osmotic test) was evaluated. The results were analyzed by means of ANOVA, with statistical package SPSS 15.0 for Windows with p<0.05. Results: the samples with melatonin on day 0 presented greater enzymatic activity without significant differences, sustained until day 01 with significance (p<0.05) in comparison to the control group; with respect to membrane integrity (HOST +) the samples with melatonin presented a significant elevation (p<0.05) of the percentage of HOST + sperm in difference to other groups at day 0 of preservation, keeping on day 01 of conservation. Conclusion: Melatonin improves the activity of SOD in seminal plasma and membrane integrity during the conservation of pig semen at 16 °C.Esta investigación tiene como objetivo determinar el efecto de la melatonina sobre el superóxido dismutasa (SOD) en el plasma seminal e integridad de membrana espermática durante la conservación a 16°C. Metodología: Se tomaron muestras seminales de verracos entre 7-18 meses de edad mediante técnica manual de extracción de mano enguantada en Inversiones Porcinas C.A. Las muestras óptimas fueron diluidas y divididas en alícuotas: control (con diluyente), control con vehículo (diluyente y etanol), semen con melatonina (1,25 mM) almacenándose las alícuotas a 16ºC para posterior valoración al día 0 y 1 de la preparación. Se evaluó la actividad enzimática de la SOD (kit comercial Cayman®) e integridad de membrana (test hipo-osmótico). Los resultados se analizaron mediante ANOVA, con paquete estadístico SPSS 15.0 para Windows con p<0,05. Resultados: las muestras con melatonina el día 0 presentaron actividad enzimática mayor sin diferencias significativas, sostenida hasta el día 01 con la significancia (p<0,05) en comparación al grupo control; con respecto a la integridad de membrana (HOST+) las muestras con melatonina presentaron una elevación significativa (p<0,05) del porcentaje de espermatozoides HOST+ en diferencia a otros grupos al día 0 de conservación, manteniéndose el día 01 de conservación. Conclusión: La melatonina mejora la actividad de la SOD en plasma seminal e integridad de membrana durante la conservación de semen cerdo a 16°C.