En el presente trabajo se reporta, la síntesis en fase sólida y caracterización por espectrometría de masa de diferentes péptidos. Se modificaron químicamente mediante síntesis en solución y en fase solida los aminoácidos valina y cisteína, al N-metilar los grupos aminos de los respectivos aminoácidos, asimismo se introdujeron diferentes grupos protectores para poder llevar a cabo, la primera síntesis en fase sólida y caracterización por espectrometría de masa del Biciclo Octadepsipéptido Triostin A, mediante la introducción de un concepto novedoso, la protección basada en la “restricción de la movilidad conformacional”. Estas nuevas condiciones permitieron obtener 83 mg del péptido Triostin A crudo con un 51 % de pureza, luego de 12 pasos, usando 6 grupos protectores diferentes (Fmoc, Alloc y Boc para los Nα−Aminoácidos); Trt para el grupo hidroxilo, Acm para el grupo sulfhídrico de la cisteína y p-alcoxibencil para el carboxilo terminal. Dos de los péptidos uno de cadena corta (T9-1201) y otro de cadena larga (T9-1202) se anclaron a la molécula 4-Androsten-17β-ol-3-ona (Testosterona), a través de un espaciador de ácido succínico, enlazado al grupo hidroxilo (OH) que se encuentra en la posición 17 de la molécula esteroidal. Se evaluó el efecto citotóxico sobre las células Vero de compuestos Esteroidales y la testosterona modificada, este último evidencio un cambio en la actividad citotóxica incrementando el % de viabilidad celular en un 64% para T9-1201 y en 78 % para T9-1202 a 50μg /mL. In this work, we report the solid phase synthesis and characterization by mass spectrometry of different peptides . The amino acids valine and cysteine the first solid phase synthesis and characterization were chemically modified by synthesis in solution and in solid phase , the N - methylated amino groups of the respective amino acids , different protecting groups are also introduced in order to carry out , by mass spectrometry bycicle Octadepsipéptido Triostin A, by introducing a novel concept , protection based on " restriction of conformational mobility." These new conditions allowed to obtain 83 mg of the crude peptide Triostin A with 51 % purity after 12 steps, using 6 different protecting groups (Fmoc , Alloc and for the Boc for the N- amino acids ) to the hydroxyl group Trt , Acm for the hydrogen group and p - alkoxybenzyl cysteine to the carboxy terminus . Two of the peptides one short chain ( T9 -1201 ) and other long chain ( T9 -1202 ) were attached to the molecule 4 - Androsten - 17β -ol -3-one (Testosterone ) , through an spacer like succinic acid bound to the hydroxyl group ( OH ) that is located at position 17 of the steroidal molecule. The cytotoxic effect on Vero cells and the modified steroid compounds evaluated testosterone latter showed a change in the cytotoxic activity by increasing the % cell viability by 64% to T9 -1201 and 78 % for 1202 T9- 50μg / mL .