Existe enorme demanda mundial de desarrollar sustitutos biológicos que restauren, mantengan y mejoren la función tisular basándose en el uso combinado de: biomateriales, células y andamios para reparar tejidos lesionados o enfermos. Objetivo: Cultivar y caracterizar las células epidérmicas y mesenquimales de gelatina de Wharton sobre matrices de quitosano. Método: Procesamiento de gelatina de Wharton: Los cordones umbilicales fueron obtenidos de gestantes a término que firmaron el consentimiento informado. Después de cada nacimiento se secciono 5 a 10 cm de cordón umbilical, las muestras se colectaron en quirófano, conservadas en medio de transporte y llevadas al Laboratorio de Bioingeniería de Tejidos de la Universidad Simón Bolívar. El tejido se cortó en pequeños fragmentos y se colocó en placas de cultivos para obtener células por migración. Se mantuvo en incubadora y el medio de cultivo se cambió cada 3 días hasta obtener el cultivo primario, el cual se amplificó hasta lograr 3 a 4 millones de células que permitió la fabricación del sustituto dérmico empleando geles de quitosano. Se evaluó su capacidad de diferenciación al ser tratadas con medio osteogénico. Obtención de células epidérmicas: Las muestras de piel se lavaron con tampón y se retiró la hipodermis. Las muestras se cortaron en fragmentos de 3–4 mm2 y se separó la epidermis de la dermis por digestión. Los cultivos celulares se mantuvieron en DMEM suplementado con 20% de suero fetal bovino. Se evaluó la biocompatibilidad celular sobre la membrana de quitosano mediante: Determinación de adhesión y proliferación por MTS, Tinción con Faloidina-FITC y DAPI.There is huge global demand to develop biological substitutes that restore, maintain and improve tissue function based on the combined use of biomaterials, cells and scaffolds to repair damaged or diseased tissues. Objective: To cultivate and characterize epidermal and mesenchymal cells of Wharton's jelly on chitosan matrices. Method: Processing of Wharton's jelly: Umbilical cords were obtained from pregnant women at term who signed the informed consent. After each birth was sectioned 5 to 10 cm of umbilical cord samples were collected in the operating room, preserved in transport medium and taken to Tissue Bioengineering Laboratory at Simon Bolivar University. The tissue was cut into small pieces and placed into culture plates for migrating cells. Incubator and remained in the culture medium was changed every 3 days until the primary culture , which was amplified to a further 3 to 4 million cells allowed the production of the dermal substitute employing chitosan gels . Their ability to differentiate when treated with osteogenic medium was evaluated. Obtaining epidermal cells : The skin samples were washed with buffer and retired hypodermis . Samples were cut into 3-4 mm2 pieces and epidermis the dermis was separated by digestion. The cell cultures were maintained in DMEM supplemented with 20% fetal bovine serum. Determination of adhesion and proliferation by MTS, FITC - phalloidin staining and DAPI: cellular biocompatibility of chitosan membrane was evaluated by.