| dc.description.abstract | El fracaso de la terapia endodóntica está asociado en un gran porcentaje a la persistencia
bacteriana. Los microorganismos asociados a las infecciones endodónticas persistentes
representan aún un mundo no explorado en su totalidad ya que solo el nivel de evidencia
disponible ha permitido identificar su composición, pero aún queda por dilucidar entre otras
cosas, cual es la posible diversidad clonal, lo que nos permitiría caracterizarlas,
ayudándonos a comprender de mejor manera su patogenicidad y la capacidad de ciertas
especies o de cepas de una misma especie para sobrevivir al tratamiento. Por lo
mencionado, el propósito de este estudio fue conocer la diversidad clonal de aislados de
Enterococcus faecalis, Pseudomonas putida, Propionibacterium acnes obtenidos desde
dientes con infecciones endodónticas persistentes, empleando técnicas moleculares como
macrorestricción del genoma por electroforesis en gel de campo pulsado (Pulsed field gel
electrophoresis, PFGE), amplificación aleatoria del ADN polimórfico (Random Amplified
Polimorphic DNA, RAPD) y reacción en cadena de la Polimerasa de elementos
Palindrómicos Extragénicos Repetitivos (Repetitive element sequence based-Polimerase
Chain Reaction REP-PCR) respectivamente. El análisis de PFGE se realizó con el software
BioNumerics, versión 6.3 (Applied Maths, Inc., Austin, TX, USA) para E. faecalis y GelJ 2.0
para Pseudomonas spp. y el criterio utilizado para la construcción de las agrupaciones o
cluster fue el coeficiente Dice con nivel de tolerancia 1.5-2%. Finalmente se construyó un
dendrograma de los cluster, estableciendo el 85% como corte para clasificar un grupo
estrechamente relacionado. Las secuencias recA se analizaron, utilizando el software
Geneious® 9.1.8, empleando el método neighbor-joining y el modelo de distancia genética
de Jukes-Cantos, con 9999 réplicas de remuestreo de arranque.
Los aislados de E. faecalis presentaron dos grupos clonales con un 72.3% índice de
similitud, en tanto que P. putida mostró dos grupos clonales y policlonalidad en dos aislados
de un mismo paciente. Por su parte, C. acnes no se logró amplificar mediante REP-PCR, por
lo que se utilizó la filotipificación que permitió la amplificación de las secuencias de
nucleótidos recA mostrando 2 grupos clonales. Se observó homogeneidad y heterogeneidad
entre cepas de diferentes pacientes y un alto grado de homogeneidad entre cepas
intrapacientes. Por lo tanto, los aislados de E. faecalis, P. putida y C. acnés en dientes con
infecciones endodónticas persistentes presentan cepas monoclonales entre sí en un mismo
paciente como en diferentes pacientes, así como policlonalidad entre pacientes. La literatura
registra amplia información de E. faecalis en su rol en las infecciones endodónticas
persistentes, lo contrario sucede con P. putida y C. acnes por lo que estos resultados
aportan información para una mejor comprensión de estas cepas causantes de la
patogénesis de las infecciones del conducto radicular. | |
