Determinación de potenciales interacciones de proteínas con la PrPc en la enfermedad de Alzheimer.

Abstract

La proteína priónica celular (PrPC), ha sido implicada en la señalización fisiopatológica que lleva a la pérdida sináptica inducida por el péptido -amiloide en el contexto de la enfermedad de Alzheimer. Se ha sugerido que PrPC, el que se ubica en la cara externa de membrana plasmática de neuronas unido a ella por un anclaje GPI, podría actuar como receptor mediador de la toxicidad inducida por el péptido A. Varios estudios muestran que la interacción de PrPC con oligómeros de A activaría una vía de transducción de señales, que debido a la ausencia de dominios transmembrana en PrPC debe ser mediada por una proteína transmembrana no conocida. Una proteína transmembrana interesante de analizar como transductor de señales de PrPC inducidas por oligómeros de A, corresponde a la proteína precursora amiloide (APP). La interacción entre PrPC y APP ha sido sugerida en algunos estudios del interactoma de ambas proteínas. Sin embargo, aún falta evidencia para demostrar su interacción directa, y si esta interacción tiene un carácter funcional. Debido a esto, el presente trabajo propone buscar interacciones entre PrPC y APP en el contexto de la enfermedad de Alzheimer, utilizando aproximaciones bioinformáticas de docking proteína - proteína y ensayos de colocalización y coinmunoprecipitación. Los análisis de docking revelaron cerca de 35 pares de residuos que conformarían los puntos de interacción entre ambas proteínas, los cuales fueron encontrados en diferentes dominios de APP. Hay que destacar el dominio E2 (3NLY) arrojo 12 pares de residuos en interacción con PrPC con excelentes valores energéticos. Además, fueron realizados diferentes ensayos de colocalización los cuales resultaron positivos para PrPC y APP. Todas las coninmunoprecipitaciones resultaron positivas para interacción, pero los controles realizados para APP revelaron la coinmunoprecipitación de un fragmento de 55kDa que podría ser un fragmento previamente reportado. Finalmente, con todos estos resultados nuestro trabajo da lugar a las primeras directrices para determinar la interacción entre ambas proteínas. Toda esta información permitirá el desarrollo de diferentes experimentos a futuro para definir la interacción y para luego analizar las consecuencias funcionales de la interacción PrPC -APP.