| dc.description.abstract | Un contaminante emergente de gran renombre estos últimos años ha sido la
Nicotina. La Nicotina es el componente principal del humo del tabaco, pero este a
la vez se metaboliza en diversos otros compuestos químicos dañinos para la salud.
La Cotinina es el metabolito que se genera en mayor concentración, y este a su vez,
se convierte en trans-3´-Hidroxicotinina.
Se han reportado diversos estudios de efectos adversos para la salud el estar
expuesto a estos metabolitos de forma prolongada, no solamente en fumadores
activos, sino que también en fumadores pasivos, ya que estos últimos se encuentran
expuestos silenciosamente sin tener un control del tiempo o concentraciones que
se van acumulando.
La cuantificación de este tipo de analitos está dada principalmente en muestras
biológicas como el plasma, el pelo, las uñas y la orina, siendo esta última la de
interés en el presente estudio por su fácil recolección y de mayor acceso respecto
a otras, pero a la vez puede ser un gran desafío debido a las bajas concentraciones
que se pueden encontrar, necesitándose rigurosos pasos de preparación de
muestra antes de su determinación analítica.
En este trabajo se desarrolló una metodología analítica para la determinación de la
Cotinina y la trans-3´-Hidroxicotinina desde muestras de orina, mediante la técnica
de microextracción por sorción en disco rotatorio (RDSE), y su posterior detección
y cuantificación mediante cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de
masas (GC-MS).
RDSE se seleccionó por ser una técnica económica, versátil y ecoeficiente (química
verde), mientras que GC-MS ofrece una buena sensibilidad y límites de detección
bajos para la investigación en muestras complejas.
Los analitos son retenidos y pre concentrados en la fase sorbente Oasis MCX, la
cual se encuentra inmovilizada sobre un disco rotatorio con cavidad central. Las
condiciones óptimas de extracción fueron: Una agitación de 2000 rpm por un tiempo
de 60 minutos, volumen de muestra de 20 mL (2 mL de orina y 18 mL de solución
acida de HCl 0.5), “clean up” post extracción con 10 mL de una solución metanol –
agua (30:70) por 20 minutos, desorción de una etapa de 20 minutos con 10 mL de
una solución amoniaco-metanol (20:80). Posteriormente el extracto se evaporó con
nitrógeno hasta sequedad para seguir con la derivatización donde al eluato seco se
le agregó 50 μL del derivatizante N-metil-N-(trimetilsilil)-trifluoroacetamida (MSTFA)
y 50 μL de piridina llevando esto a un ambiente de 70°C por 30 minutos. Una vez
realizada la derivatización, se inyectó 2 μL de muestra en el GC-MS. Además, en el
proceso se incorporó un estándar “surrogate” rac-Cotinine-D3.
Los límites de detección y cuantificación del método fueron de 0.7μg·L-1 y 0,9μg·L-1
para tran-3’-Hidroxicotinina respectivamente y de 21 μg·L-1 y 29 μg·L-1 para Cotinina
respectivamente. Las recuperaciones en muestras blanco de orina que fueron
enriquecidas con 250 μg·L-1 de los analitos y fueron de un 56% para trans-3’-
Hidroxicotinina y de un 86% para Cotinina.
El método descrito fue aplicado en 8 muestras reales provenientes tanto de mujeres
como de hombres en un amplio rango de edad (4 a 84 años) correspondientes tanto
a fumadores activos como a fumadores pasivos. La concentración de los analitos
detectados se obtuvo en un intervalo de 475-1119 μg·L-1 para trans-3´-
Hidroxicotinina y de 113-1108 μg·L-1 para Cotinina | |
