Efecto del glutatión reducido (GSH) sobre la calidad espermática de verraco bajo condiciones de trópico subhúmedo

Abstract

The objective of the present investigation was evaluating the effect of reduced glutathione (GSH) on sperm quality of boars under tropic conditions. 40 ejaculates from 4 boars (10 replicates per boar) of commercial lines Yorkshire / Landrace and Pietrain / Duroc between 24 and 28 months of age, were collected at 7 day intervals by the gloved hand technique. The ejaculate was diluted 1:10 with 2000 x106 (viable sperm), L - Reduced Glutathione (GSH, Sigma - Aldrich ®) added to the diluent half conservation (MIII ®). Three groups were formed, control group without GSH and two treatments with GSH concentrations: 1 mM and 2 mM, evaluating the seminal variables: total mobility in optical microscope, Integrity of the plasma membrane by means of the immunofluorescence probe (SYBR-14 / PI), Dual osmotic resistance test (HOST, hypoosmotic solution) / acrosomal integrity (Coomassie blue 0.22%). The measurements were made at 0, 24, 48, 72 and 96 hours in the semen conserved at 170C. experimental design factorial was used 3 x 4 x 5 (3 GSH concentrations: 0, 1 and 2 mM: 4 variables: Total mobility, plasma membrane integrity, acrosomal integrity and osmotic tolerance and 5 conservation measurements: 0, 24, 48, 72, 96 hours); the data obtained were analyzed through repeated measurements of the fixed-effect model and the differences between treatments were obtained through means of least squares and significance of P <0.05. The plasma membrane integrity of boar sperm supplemented with 2 mM GSH was 88.0% and with 1 mM GSH of 87.3%, not observing difference between GSH concentrations, but with the control group with 85.2% (P <0.05).

El objetivo de la presente investigación fue evaluar el efecto del Glutatión reducido (GSH) sobre la calidad espermática de verracos bajo condiciones de trópico subhúmedo. Se utilizaron 40 eyaculados provenientes de 4 verracos (10 réplicas por verraco) de líneas comerciales Yorkshire/Landrace y Pietrain/Duroc entre 24 y 28 meses de edad, se colectaron a intervalos de 7 días por la técnica de mano enguantada. El eyaculado fue diluido 1:10 con 2000 x106 (espermatozoides viables), se utilizó L - Glutatión Reducido (GSH, Sigma-Aldrich®) adicionado al diluente media duración (MIII®). Se formaron 3 grupos, grupo control sin GSH y dos tratamientos con concentraciones de GSH: 1 mM y 2 mM, se evaluó las variables seminales de movilidad total en microscopio óptico, Integridad de la membrana plasmática mediante la sonda de inmunofluorescencia (SYBR-14/PI), Ensayo dual de resistencia osmótica (HOST, solución hiposmótica) / integridad acrosomal (Azul de coomassie 0.22 %). Las mediciones se realizaron a las 0, 24, 48, 72 y 96 horas en el semen conservado a 170C. Se utilizó un diseño factorial 3 x 4 x 5 (3 concentraciones de GSH: 0, 1 y 2 mM; 4 variables: Movilidad total, integridad de membrana plasmática, integridad acrosomal y tolerancia osmótica; 5 mediciones de conservación: 0, 24, 48, 72 y 96 horas); los datos obtenidos se analizaron a través de mediciones repetidas de modelo de efectos fijos y las diferencias entre tratamientos se obtuvieron a través de medias de mínimos cuadrados y significancia de P < 0.05. Los resultados indican que la adición de GSH mejoró (P<0.05).