Purificación del virus de la fiebre aftosa por ultracentrifugación.

Abstract

Se demuestra que la ultracentrifugación es un método de separación zonal que utiliza un gradiente de densidad para asegurar la estabilidad gravitacional previniendo la mezcla. La partícula que se sedimenta es más pesada o más liviana. Si ella flota, es que el medio en el cual se suspende y la solución de partículas, es más pesada que el solvente. Si la solución en la zona que contienela partícula es menos densa que la zona inferior, debe añadirse un tercer componente que no tiene efecto sobre la estabilidad o agregación de las partículas que se van a separar. Los materiales más utilizados son: sucrosa, gliceral, tartrato de potasio y cloruro de cesio. Se ha establecido que la rata a la cual las partículas sedimentan depende de su forma, tamaño y densidad de la fuerza centrífuga y de la densidad y viscosidad del medio que la suspende. Si la región de gradiente tiene una densidad cercana a la partícula que va a ser separada, la separación obtenida después de la centrifugación depende de la densidad de la partícula. Este método se conoce como centrifugación isopiónica o centrifugación por equilibrio de gradiente de densidad. Otros aspectos relacionados con materiales y métodos comprenden: preparación de los gradientes de cloruro de cesio; ultracentrifugación; determinación del contenido proteico; estimación del grado de concentración proteica con el reactivo de Folin-Ciocalten. Los reactivos; el estandar proteico; el procedimiento para proteínas en solución o solubilizadas en alkalí diluido; el procedimiento para proteinas insolubles; la modalidad empleada en el laboratorio de enfermedades vesiculares