Tese de doutorado
Variabilidade microbiológica de isolados de Paracoccidioides brasiliensis obtidos de pacientes com diferentes formas clínicas
Fecha
1999Registro en:
São Paulo: [s.n.], 1999. 105 p.
epm-016294.pdf
Autor
Svidzinski, Terezinha Inez Estivalet [UNIFESP]
Institución
Resumen
Diversos trabalhos tem demonstrado variabilidade biologica em Paracoccidioides brasiliensis. As multiplas manifestacoes clinicas da PCM e a depressao da resposta imune celular, especialmente do tipo 1, que e recuperada apos terapeutica efetiva, sao indicativos de que os processos de infeccao e evolucao da doenca dependem tambem de fatores relacionados a virulencia do agente. Com o objetivo de investigar possiveis mercadores que pudessem estar associados ao papel do agente na determinacao da forma clinica da PCM foi proposto um estudo de algumas caracteristicas microbiologicas comparando-se 30 isolados de P. brasiliensis. O primeiro grupo A', foi constituido por 15 cultivos obtidos de pacientes que desenvolveram a forma aguda da doenca. O grupo C representou os isolados de pacientes com PCM forma cronica. Os fungos, recebidos de varias procedencias, eram mantidos em laboratorio por periodos variaveis. A fim de recuperar o potencial de virulencia, supostamente atenuado durante os subcultivos in vitro, todos os fungos foram inicialmente reisolados apos desenvolvimento de orquite em hamsters. O estudo foi basicamente desenvolvido com a forma leveduriforme do fungo, obtida por cultivos em PYGA, a 35º C. Os parametros incluiram: morfologia microscopica (morfometria da celula-mae e numero de brotamentos)- velocidade de transformacao in vitro da forma miceliana para a forma leveduriforme; determinacao de curvas de crescimento; expressao da glicoproteina de 43KDa (gp43); polimorfismo isoenzimatico e determinacao do perfil de susceptibilidade, in vitro, dos isolados frente aos antifungicos empregados na terapeutica da PCM. Em todos os aspectos analisados ficou evidente a expressiva variabilidade biologica entre os isolados. Foi possivel padronizar o teste de susceptibilidade aos antifungicos atraves de adaptacoes a tecnica de referencia proposta pelo NCCLS, (l997). Os resultados mostraram-se seguros e reprodutiveis desde que se utilizem cultivos com alto grau de viabilidade celular. Foram testadas anfotericina B, 5-fluorocitosina e os azolicos itraconazol, cetoconazol e fluconazol. Frente a 5-fiuorocitosina, todos os isolados foram resistentes a concentracao iguais ou superiores a 64mg/mL da droga. Em relacao aos demais antifungicos, houve variabilidade nos titulos das ClMs nao se caracterizando, porem, nenhum caso de resistencia microbiana in vitro. As curvas de crescimento, determinadas atraves de ...(au)
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