Artigo Publicado em Periódico
Flow cytometry: a literature review
Fecha
2015-05Registro en:
Rev. Ciênc. Méd. Biol., Salvador, v. 14, n. 2, p. 211-224, mai./ago. 2015
2236-5222
v.14, n.2
Autor
Errante, Paolo Ruggero
Ebbing, Pâmela Carolina Cruz
Rodrigues, Francisco Sandro Menezes
Ferraz, Renato Ribeiro Nogueira
Silva, Neusa Pereira da
Errante, Paolo Ruggero
Ebbing, Pâmela Carolina Cruz
Rodrigues, Francisco Sandro Menezes
Ferraz, Renato Ribeiro Nogueira
Silva, Neusa Pereira da
Institución
Resumen
Introdução: a citometria de fluxo é uma técnica que utiliza um aparelho de detecção óptico-eletrônico para analisar as propriedades
físicas e químicas das partículas microscópicas suspensas em meio líquido. Objetivo: revisar a literatura em busca dos principais
estudos que utilizaram a citometria de fluxo como a metodologia principal. Método: os artigos foram selecionados de acordo com
seu fator de impacto no Journal of Citation Reports. Revisão da literatura: um feixe de luz é dirigido para um fluxo contínuo de
partículas suspensas marcadas com substâncias fluorescentes. A luz é difundida de forma diferente a partir do feixe de partículas
e é capturada por meio de sensores em linha e perpendiculares ao feixe de luz. Tais partículas microscópicas são conjugadas com
substâncias fluorescentes que emitem luz de frequência mais baixa do que a fonte de luz. A luz emitida é capturada por meio
de sensores e as partículas são analisadas de acordo com flutuações de brilho de cada um dos detectores e/ou de emissão de
fluorescência. O resultado deste processo é a formação de imagens em tempo real para cada célula da fluorescência, dispersão e
transmissão de luz. Um dos principais problemas de citometria de fluxo é determinar se um subconjunto de células marcadas com
anticorpos monoclonais conjugados com fluorocromos é positivo ou negativo. Ganhos de compensação devem ser determinados e
aplicados corretamente, e os controles devem ser realizados de forma concisa, com a adoção de um controle biológico, controle de
isotipo ou fluorescência menos uma (FMO). Nenhum desses controles é considerado ideal, e deve ser escolhido de acordo com o
número de rotulagem, paucidade da expressão de moléculas na superfície ou no meio intracelular em determinadas subpopulações
de células, sobreposição de comprimentos de onda ou ligação inespecífica dos anticorpos conjugados com fluorocromo. Conclusão:
devido ao seu grande potencial, o uso da citometria de fluxo foi expandido para diversos campos das ciências biológicas, e é utilizada
rotineiramente em clínicas de diagnóstico, e laboratórios de pesquisa básica e aplicada.