Se implementó un método para la determinación cualitativa de los hipoglicemiantes orales sulfonilureas y biguanidas: tolbutamida, clorpropamida, glibenclamida, glipizida y metformina en orina, mediante la técnica de cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC). La extracción se efectuó con solventes orgánicos a pH 4 y 9. La longitud de onda utilizada para la localización de los “spots” fue 254 nm y para la obtención de los espectros se utilizó una lámpara de deuterio, en el rango de 200–400 nm. La detección de los analitos se efectuó mediante la comparación con estándares de concentración conocida. La extracción de las sulfonilureas se realizó a pH 4 con éter y la de metformina a pH 9, con cloroformo: alcohol isopropílico (85:15). Se determinó además el límite de detección de cada uno de estos fármacos. Se realizó un experimento en sangre y vísceras a pH 9, extrayendo directamente con acetonitrilo para la determinación de metformina en una persona intoxicada. A futuro se debe implementar un método de determinación cuantitativa que incluya muestras de orina y sangre, lo cual constituiría una valiosa herramienta para análisis químico–toxicológico, de estos fármacos hipoglicemiantes orales.A method was implemented for the qualitative determination of the oral antidiabetic sulfonylureas and biguanides: tolbutamide, chlorpropamide, glibenclamide, glipizide and metformin in urine, by means of high resolution thin layer chromatography (HPTLC). Direct extraction was carried out with organic solvents at pH 4 and 9. The wave longitude used for the localization of the spots was 254 nm and for obtaining the spectra a deuterium lamp was used, in the 200–40nm range. Detection of these substances was carried out by means of comparison with standards of known concentration. The extraction of the sulfonylureas was carried out at pH 4 with ether and of metformin at pH 9, with chloroform: isopropylic alcohol (85:15). The limit of detection of each one of these drugs, were also determined. An experiment was carried in blood and viscera at pH 9, extracting directly with acetonitrile for the determination of metformina in an intoxicated person. In the future, a method of quantitative determination should be implemented including urine samples and blood, which would constitute a valuable tool for the chemical toxicologycal analysis, of these antidiabetic drugs.