| dc.description.abstract | "El género Azospirillum pertenece a un grupo de bacterias Gram-negativas que poseen la capacidad de fijar nitrógeno y utilizar amonio, nitratos, nitritos o aminoácidos como fuentes de nitrógeno y carbono, son altamente móviles (debido a que cuentan con un flagelo polar) y en condiciones ambientales desfavorables pueden adoptar una forma quística la cual estará cubierta por una capa de polisacáridos. Los Azospirilla se encuentran íntimamente ligados a la rizósfera, promoviendo el desarrollo vegetal, por tal razón es denominada como una rizobacteria promotora del crecimiento vegetal o PGPR (del inglés Plant Growth-Promoting Rhizobacteria). Esta acción benéfica puede ser originada por distintos mecanismos entre los que se encuentran la eliminación de organismos patógenos presentes en las raíces de las plantas, la fijación de nitrógeno atmosférico, solubilización de fósforo y otros minerales o por la producción de fitohormonas. Para establecer una asociación bacteria-planta exitosa, el microorganismo desarrolla biopelículas, cuya formación es regulada por el di-GMPc. Esta molécula, la cual es denominada como un segundo mensajero, participa en una amplia variedad de procesos celulares, mediante regulación a nivel transcripcional, traduccional y postraduccional. Para la síntesis del di-GMPc es necesaria la presencia de dos moléculas de GTP; esta reacción es mediada por proteínas con dominios GGDEF, denominados por su secuencia altamente conservada de aminoácidos, GG(D/E)E, los cuales poseen actividad diguanilato ciclasa (DGC); mientras que la degradación del di-GMPc es llevada a cabo por proteínas con dominios EAL o HD-GYP con actividad fosfodiesterasa (PDE). Empleando análisis bioinformático se conoció la secuencia genónima codificante para la proteína diguanilato ciclasa C (DgcC), se realizó la mutación del gen dgcC mediante la inserción de un casete de resistencia a estreptomicina (Sm); la cepa mutante obtenida se denominó A. brasilense 102-C. Al analizar los fenotipos de la cepa 102-C, ésta poseía un retraso en el crecimiento, además una disminución en la formación de biopelícula así como también un decremento en la movilidad con respecto a la cepa A. brasilense Sp245. Para corroborar que la DgcC se encuentra involucrada en estos fenotipos, se procedió a realizar una complementación génica en trans. Al analizar la cepa complementada resultante, A. brasilense AK19 (pdgcC), ésta no presentó una diferencia estadísticamente significativa en cuanto a formación de biopelícula y producción de EPS con respecto a la cepa mutante A. brasilense 102-C; pudiendo concluir que no existe una complementación ya que no se restauró el fenotipo de la cepa silvestre. Por otra parte, evaluamos la formación de película. Ésta es una estructura que se encuentra presente en la interfase agua-aire y se ha demostrado, en el caso de Pseudomonas aeruginosa, que presenta una composición distinta a aquella observada en la biopelícula. Por otra parte, se ha descrito en Azospirillum brasilense, que las bacterias presentes en esta estructura poseen la capacidad de fijar nitrógeno. Con los datos obtenidos en este trabajo sugerimos que el gen dgcC se encuentra involucrado en la formación de película. Por otra parte, es posible que la inserción del casete de Sm pudo originar una mutación polar, afectando al gen río abajo a dgcC, probable responsable de la falta de complementación. Estudios futuros responderán a esta pregunta." | |
