Utilización del patrón de restricción del DNA codificante para el RNA ribosomal de la subunidad pequeña para la caracterización de apicomplexa

Abstract

Los Apicomplexos constituyen un phylum de protozoarios que se caracterizan por ser parásitos obligados de una gran variedad de huéspedes vertebrados e invertebrados. Hoy en día hay fuertes polémicas en tomo a su clasificación taxonómica, sus relaciones filogenéticas, y los patrones de coevolución con sus hospederos. El gen que codifica para el ARN ribosomal de la subunidad pequeña (ARN-SURp) se utiliza como marcador molecular para resolver estas inquietudes. A partir del ADN de las especies de la familia Sarcocystidae (Sarcocystis cruzi, Sarcocystis sp. de Didelphis marsupialis y Sarcocystis sp. de Columbina talpacoti y Toxoplasma gondii), y de especies de la familia Plasmodiidae (Plasmodium de Anolis chloris, P. simium, y P. falciparumi, se amplificó por PCR el gen que codifica para el ARN de la subunidad ribosomal pequeña (ARN- SURp) usando los iniciadores P5-P3, 0009-2134 Y566R-567R. Se compararonlos patrones de restricción Hind III, Eco RI, Sau 3AI y Alw 261 del DNA ribosomal. La prueba de riboprini mostró que además de discriminar entre familias permite caracterizar diferencias a nivel de género y especie.

Apicomplexa is a Protozoa phylum in which all members are obliged parasites of a wide range of vertebrate and invertebrate hosts. There is an ongoing controversy onsystematics, phylogenetic relationships and parasite - host coevolution patterns. The SSU ribosomal gen has been used as a molecular marker in order to solve these issues.From DNA of the species of the Sarcocystidae family (Sarcocystis cruzi, Sarcocystis sp. from Didelphis marsupialis, Sarcocystis sp. from Columbina talpacoti and Toxoplasmagondii), and from the species of the Plasmodiidae family (Plasmodium from Anolis ehloris, P. simium, and P. falciparum), the SSU ribosomal DNA fragemnt wasamplified by PCR, using the pair of primers P5-P3, 0009-2134 and 566R-567R. Hind III, Eco RI, Sau 3AI and Alw 261 restriction pattems were compared. It was shownthat riboprinting analysis was able to discriminate between these Apicomplexa families and at the same time detected differences between genus and intraespecific variants.