Inmunorreactividad de neuronas gabaergicas y glutamatergicas en la corteza y el cerebelo de ratones infectados con rabia

Abstract

La rabia es una enfermedad viral que produce cambios en la función neuronal. Estos cambios, entre otros, inducen alteraciones en el metabolismo de los neurotransmisores. Los signos clínicos de la rabia indican que se podría afectar el sistema GABA-glutamato y, por lo tanto, el balance entre la inhibición y excitación neuronal. El objetivo de este trabajo consistió en evaluar la inmunorreactividad de neuronas GABAérgicas y glutamatérgicas en la corteza y el cerebelo de ratones infectados con rabia, mediante dos vías de inoculación. Se inocularon ratones adultos por vía intramuscular e intracerebral con virus de la rabia CVS; en la etapa terminal de la enfermedad se anestesiaron y se sacrificaron por perfusión con paraformaldehído y glutaraldehído. Se obtuvieron cortes en vibrátomo y se procesaron para inmunohistoquímica con anticuerpos anti-Glu (glutamato), anti-GABA y anti-PV (parvoalbúmina); una proteina buffer de calcio que además sirve como marcador de algunas células GABAérgicas. Se realizaron conteos celulares y análisis densitométricos. En la corteza cerebral motora se demostró aumento significativo en la Glu-ir y pérdida de GABA-ir por las dos vías de inoculación, pero en la corteza somatosensorial los resultados fueron contrarios. En las folias del cerebelo se halló aumento de Glu-ir en la capa granular así como aumento de PV-ir y pérdida de GABA-ir en la capa molecular, sólo después de la inoculación intramuscular. Los resultados fueron similares en los núcleos profundos. La inoculación intracerebral del virus no provocó cambios de inmunorreactividad para GABA, Glu, y PV en ninguna de las áreas del cerebelo. Aunque el estudio de PV no hacía parte de los objetivos permitió realizar diversas interpretaciones entre ellas el establecer que la expresión de la proteína aumenta como respuesta al aumento del glutamato y la pérdida de GABA, por otro lado con este trabajo se ilustra por primera vez que que el virus de la rabia afecta el metabolismo de GABA y el glutamato de manera antagónica y que los efectos varían según la ruta de inoculación y el área encefálica evaluada.

Abstract. Rabies is a viral disease that induces changes in neuronal function. These changes induce alterations in the metabolism of neurotransmitters. Clinical signs of rabies indicate that the system could affect GABA-glutamate and, therefore, the balance between inhibition and neuronal excitation. The aim of this study was to evaluate the immunoreactivity of GABAergic and glutamatergic neurons in the cortex and cerebellum of mice infected with rabies through two routes of inoculation. Adult mice were inoculated intramuscularly and intracerebrally with CVS rabies virus, in the terminal stage of disease were anesthetized and sacrificed by perfusion with paraformaldehyde and glutaraldehyde. In vibratome sections were obtained and processed for immunohistochemistry with anti-Glu (glutamate), anti-GABA and anti-PV (parvoalbúmina), a calcium buffer protein also serves as a marker of GABAergic cells. Cell counts were performed and densitometric analysis. In the motor cortex showed significant increase in the Glu-ir and loss of GABA-ir by both routes of inoculation, but in the somatosensory cortex results were contrary. In the cerebellar folia was found increased Glu-ir in the granular layer and increased PV-ir and GABA-ir loss in the molecular layer, only after intramuscular inoculation. The results were similar in the deep nuclei. Intracerebral inoculation of virus did not cause changes in immunoreactivity for GABA, Glu, and PV in any area of the the cerebellum. Although the study of PV was not part of the objectives allowed for different interpretations including establishing that the protein expression increases in response to increased glutamate and GABA loss, on the other side with this work is illustrated for the first time the rabies virus affects the metabolism of GABA and glutamate in an antagonistic manner and that the effects vary by route of inoculation and the brain area evaluated.