Evaluación del proceso de salida del parásito plasmodium falciparum

Abstract

Plasmodium falciparum es el agente causante de la malaria en humanos. Su célula hospedera final es el eritrocito, donde se aloja en una vacuola parasitófora. La salida de P. falciparum es un proceso de importancia vital para el parásito ya que garantiza próximas infecciones y la supervivencia del mismo. En este trabajo se explora el mecanismo de salida del parásito. Se determinó mediante seguimiento de cultivos que el parásito sale entre las 42 y 48 horas después de sincronizar, y usando fluorescencia en la membrana se estableció que el parásito tras su replicación puede liberar la vacuola completa o cada parásito individualmente. Se midió la liberación de sondas citoplasmáticas CFDA-SE y calceína, además de la enzima LDH y se observa que no hay suficiente liberación del citoplasma para establecer un modelo de lisis de la membrana y por tanto se propone que el parásito puede estar usando mecanismos líticos y no líticos para ser liberado del eritrocito. Adicionalmente se realizó una búsqueda de proteínas SNARE para establecer si estas pueden estar o no involucradas en la salida del parásito si esta llega a ser mediada por fusión de membranas.

Abstract. Plasmodium falciparum is the causing agent for malaria in humans. Its final host cell is the erythrocyte, where it inhabits a parasitophorous vacuole. The exit of P. falciparum is a vital process for the parasite, as it determines the infective success and survival of this. The aim of this work is to explore the exit mechanism of the parasite. Following cultures it was determined that the parasite exits 42 to 48 hours after synchronization. Using membrane fluorescence it was established tha the parasite can release the whole vacuole or every newly replicated parasite individually. The release of cytoplasmic stains CFDA-SE and calcein, and the enzyme LDH , show that there is not enough release to establish lysis and the it is proposed that the parasite could be using lytic and non-lytic mechanisms to exit the erytrhocyte. Besides, a search for SNARE proteins was done to stablish if they could be mediating membrane fusion for exit.