Efecto de dos soluciones irrigadoras de quitosán sobre la liberación de proteínas bioactivas de la dentina radicular

Abstract

La regeneración pulpo-dentinal, requiere desinfección y acondicionamiento intraconducto para cumplir los objetivos terapéuticos. Los quelantes modifican la superficie y liberan moléculas bioactivas que estimulan las celúlas madre de la papila apical (SCAPs). El ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), quelante capaz de liberar proteínas inmersas en la matriz, ejerce un efecto residual sobre las SCAPs, y altera negativamente la superficie al utilizarse con hipoclorito de sodio. Quitosán (QS) en solución o nano-particulado (QSnp), polímero natural, antimicrobiano y quelante, induce estabilidad biológica, ampliando las alternativas para el acondicionamiento dentinal. Por tal motivo el objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad de dos preparaciones de quitosán para liberar proteínas de la matriz dentinal radicular y describir los cambios en la composición química, posterior al efecto quelante. Materiales y Métodos: Estudio experimental cuantitativo in-vitro para cuantificar sialoproteína dentinal (DSP), factor de Crecimiento Transformante Beta (TGFß1), factor de crecimiento del Endotelio Vascular (VEFG) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas Isoforma BB (PDGF-BB) liberadas con agentes quelantes. 24 hemiraices (n=6) fueron distribuidas en 4 grupos durante 5 minutos en EDTA, QS y QSnp, Posterior incubación a 37°C durante 7 días, se recogieron sobrenadantes y se congelaron hasta su procesamiento. Un ensayo ELISA cuantificó DSP. Para TGFß1, VEFG y PDGF-BB, un panel de citoquinas fue realizado. Kruskal-Wallis con Wilcoxon identificó diferencias entre los grupos. Espectroscopia Raman permitió el análisis no destructivo de los cambios químicos superficiales. Resultados: La liberación de TGF-β1, VEGF, y DSP dentinal, fue identificable en todos los grupos. La liberación de TGF- β1, ocurrió con todos los quelantes y mayor la mayor liberación de DSP ocurrió con QSnp. PDGF-BB no superó los límites de detección. Conclusión: La utilización de agentes quelantes permitió la solubilización de TGF-β1, VEGF, y DSP inmersos en la matriz dentinal radicular siendo QSnp quien promovió una liberación significativa de DSP. La espectroscopia Raman identificó la capacidad de quelación para QS y QSnp y su interacción con otros componentes de la matriz. (Texto tomado de la fuente)

Introduction: Dentin- Pulp regeneration requires disinfection and intracanal conditioning to achieve therapeutic objectives. Chelators modify the surface and release bioactive molecules that stimulate stem cells of the apical papilla (SCAPs). Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), a chelating agent capable of releasing proteins embedded in the matrix, exerts a residual effect on SCAPs, and negatively alters the surface when is used with sodium hypochlorite. Chitosan solution (QS) or nanoparticulate (QSnp), is a natural, antimicrobial, and chelating polymer, that induces biological stability, broadening the alternatives for dentin conditioning. For this reason, the objective of this work was to determine the capacity of two chitosan preparations to release proteins from the root dentin matrix and to describe the changes in the chemical composition, after the chelating effect. Materials and Methods: Quantitative in-vitro experimental study to quantify dentinal sialoprotein (DSP), Transforming Growth Factor Beta (TGFß1), Vascular Endothelial Growth Factor (VEFG) and plateletderived growth factor Isoform BB (PDGF-BB) released with chelating agents. 24 Hemi-roots (n=6) were distributed in 4 groups and immersed for 5 minutes in the chelating solution. Subsequent incubation at 37°C for 7 days, supernatants were collected and frozen until processing. An ELISA assay quantified DSP. For TGFß1, VEFG, and PDGF-BB, a cytokine bead array was performed. Kruskal-Wallis with Wilcoxon identified differences between groups. Raman spectroscopy allowed a non-destructive analysis of the chemical changes in the dentinal surface. Results: The release of TGF-β1, VEGF, and dentinal DSP was identifiable in all groups. The release of TGF-β1 occurred with all the chelators and the greatest release of DSP occurred with QSnp. PDGF-BB did not exceed detection limits. Conclusion: The use of chelating agents allowed the solubilization of TGF-β1, VEGF, and DSP immersed in the radicular dentinal matrix. QSnp promotes a significant release of DSP. Raman spectroscopy identified the chelating ability for QS and QSnp and their interaction with other matrix components.