Evaluación de la estabilidad de un extracto enzimático, obtenido de Penicillium sp. HC1, con actividad endoxilanasa bajo condiciones de almacenamiento

Abstract

Las endoxilanasas son enzimas que hidrolizan los enlaces glicosídicos presentes en el xilano que compone la hemicelulosa. La xilosa obtenida, se utiliza en la producción de xilitol, enfoque del proyecto “Producción de xilitol a partir de cascarilla de cebada, residual del proceso cervecero”, llevado a cabo en Laboratorio de Biotecnología Aplicada de la Pontificia Universidad Javeriana. Aquí se utilizan estas enzimas en extracto enzimático, el cual es almacenado en congelación (-20 ºC) o refrigeración (4 ºC) para prolongar su vida útil. Esto ha generado inconvenientes por la pérdida de actividad enzimática. Existen varias metodologías de estabilización de proteínas, una es el uso de aditivos; la sacarosa, el tritón X-100, el glicerol y glicerol con NaCl, se reportan como efectivos en el aumento de la vida útil de dichas moléculas.

En este estudio se evaluó la capacidad de los aditivos de mantener la actividad endoxilanasa del extracto enzimático durante dos meses. se produjeron las enzimas a partir del cultivo de Penicillium sp. HC1 con cascarilla de cebada. Después , se realizó una prueba de estabilidad para conocer el pH que permite a la enzima conservar su actividad. El efecto de los aditivos fue evaluado y finalmente se seleccionó el glicerol, dado su buena capacidad estabilizante y su fácil manejo. Finalmente, se realizó la optimización de la concentración del glicerol en presencia de cloruro de calcio y sulfato de manganeso, sales que han mejorado la estabilidad en otros estudios. No obstante, evidenciaron efectos negativos sobre la actividad enzimática, reduciendo la eficiencia del glicerol.