Evaluación de la respuesta inmune protectora contra Metapneumovirus humano inducida por el prototipo de vacuna compuesto por la nucleoproteína N más el adyuvante AbISCO-100

Abstract

El Metapneumovirus humano (hMPV) es el segundo agente viral causante de bronquiolitis en niños de todo el mundo. Es el origen etiológico de variados cuadros clínicos del tracto respiratorio y afecto principalmente a niños y ancianos. La infección induce una respuesta Th2 por parte del sistema inmune del hospedero produciéndose una inflamación patológica de las vías respiratorias. Luego de la resolución de la enfermedad no hay inducción de memoria inmunológica, por lo que la enfermedad causada por la infección con hMPV puede recurrir en el mismo paciente. Por esta razón una vacuna contra hMPV que induzca una respuesta inmune protectora que perdure en el tiempo es un objetivo importante para la salud pública mundial. Hasta la fecha no hay una vacuna efectiva disponible contra este virus. Este estudio evalúa la inducción de respuesta inmune protectora contra hMPV mediante vacunación con la nucleoproteína N del virus más el adyuvante ABISCO-100. Los datos muestran que los ratones vacunados desarrollan una respuesta inmune protectora frente a una infección posterior con el virus. En estos ratones vacunados y luego desafiados con el virus se midió una disminución del transcrito del gen de la nucleoproteína N de hMPV en pulmones y una reversión en la pérdida de peso comparado con los ratones infectados que no fueron vacunados. Además en pulmón se observó una reducción en la infiltración de granulocitos y células dendríticas inflamatorias (CD11b-/CD11c+) en el grupo vacunado y desafiado con el virus. Por otro lado, al estimular con proteína N del virus a esplenocitos provenientes del grupo vacunado se midió un aumento en la secreción de IFN-γ, IL-10 e IL-17A. También se observó un aumento en la concentración de anticuerpos isotipo IgG tipo IgG2A en sangre en el grupo vacunado y desafiado. Por último se determinó que la vacuna no tiene por si misma efecto en la producción de anticuerpos neutralizantes. Los resultados obtenidos en esta investigación sugieren que los ratones vacunados desarrollaron una respuesta inmunitaria protectora mediada por células T con un perfil combinado Th1/Th17 que los protegió contra la infección con hMPV y su patología asociada y que la proteína N podría ser un buen antígeno para el desarrollo de una vacuna

Worldwide, human Metapneumovirus (hMPV) is the second cause of acute respiratory tract infection in children such as bronchiolitis and pneumonia. It is the etiological origin of several clinical manifestations of the respiratory tract and mainly affects children and the elderly. The hMPV infection has been associated with an unbalanced Th2 pathological response causing inflammation and obstruction in the respiratory tract. Because a poor immunological memory induction is developed, the airway infections with hMPV and disease associated are recurrent. In consequence, an hMPV vaccine that generates protective immune response is necessary. To date there is no effective vaccine available against this virus. This study shows that vaccinated mice with N-hMPV-ABISCO developed a protective immune response against hMPV infection. Compared to non-vaccinated mice, we measured a reduction in the transcripts of the N gene of hMPV in lungs and a reduction in weight loss in vaccinated mice. Besides, in these mice there is a decrease of granulocyte infiltration and of dendritic cell infiltration of conventional migratory DCs (CD11b-/CD11c+) in lungs. Moreover, we isolated splenocytes from vaccinated and non-vaccinated mice and stimulated these cells with recombinant N protein of hMPV. The induced cytokines was measured in the supernatant tissue culture medium. We observed an increase of IFN-γ, IL-10 and IL-17A in splenocytes obtained from vaccinated mice. Total and IgG subclasses was measured in serum and higher levels of IgG and IgG2a were detected in the serum of vaccinated and challenged mice compared to naïve mice. The results obtained in this investigation suggest that the vaccinated mice developed a protective T cell-mediated immune response with a combined Th1 / Th17 profile that protected them against infection with hMPV and its associated pathology and that N protein could be a good candidate for a vaccine