AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE BACTERIAS TERMOTOLERANTES, CON ACTIVIDAD Β-GLUCOSIDASA A PARTIR DE COMPOSTA DE RESIDUOS DE LA INDUSTRIA CAÑERA

Abstract

La celulosa es una de las principales materias primas disponibles para la producción de biocombustibles. La viabilidad técnica de su uso depende principalmente al empleo de celulasas para su hidrólisis. La mayoría de las celulasas comerciales son de origen fungal y causan la acumulación de celobiosa y otros oligosacáridos (celodextrinas). Estos azúcares son difíciles de asimilar por los microorganismos comúnmente utilizados para la conversión de azúcares a etanol. El presente estudio se encuentra orientado hacia el aislamiento y selección de cepas bacterianas que presenten actividad β-glucosidasa, así como a la producción de celodextrinas a partir de celulosa comercial. Bacilos gram-positivos termotolerantes fueron extraídos de composta de biopilas en fase termofílica de la Industria Cañera y de un suelo conservado del Parque Nacional la Malinche. Cultivos líquidos fueron realizados con medio mínimo con celobiosa como única fuente de carbono, estos cultivos se incubaron a 80°C por 48h, posteriormente diluciones seriadas se realizaron en medio sólido selectivo. Setenta y cinco cepas diferentes fueron aisladas y llevadas a una selección secundaria donde el medio selectivo consistió en celotriosas, celotetrosas y celopentaosas, como única fuente de carbono, obtenidas por medio de hidrólisis enzimática y ácida de celulosa microcristalina (Avicel); del ensayo anterior, se seleccionaron 9 cepas para realizar la cuantificación de su actividad enzimática, posteriormente 3 de ellas se sometieron a un test de identificación.