Mecanismo de intercambio de aminoácidos del transportador y+L de eritrocitos de pollo: especificidad del sitio que se expone al comportamiento interno

Abstract

El transportador y+L es un intercambiador de aminoácidos que pertenece a la familia de transportadores heterodiméricos. El sitio que se expone al medio extracelular, reconoce aminoácidos catiónicos y neutros con alta afinidad en presencia de Na+ (o Li+), mientras que en K+ es específico para aminoácidos catiónicos. En este trabajo se investigó la especificidad del sitio interno, utilizando como modelo experimental membranas reselladas de eritrocitos de pollo. Se estudió la dependencia de los flujos de entrada de L-[14C]lisina de la concentración de distintos aminoácidos localizados en el compartimento intracelular en presencia de Na+, K+ o Li+. Los resultados muestran que el sitio interno presenta una marcada preferencia por L-lisina y que la unión de los aminoácidos neutros estudiados (L-glutamina, L-leucina, L-metionina) es débil. L-lisina, a concentraciones saturantes, aceleró el flujo unidireccional de entrada aproximadamente 8 veces y la constante de saturación media (K0,5) para el efecto activador en presencia de Na+ fue 0,010  0,001 mM. L-glutamina, el aminoácido neutro que se unió más fuertemente, causó el mismo efecto a una concentración 80 veces superior (K0,5: 0,8  0,27 mM). En K+, la selectividad por aminoácidos catiónicos es aún mayor. Los resultados indican que el transportador y+L muestra una marcada asimetría en los sitios de unión externo e interno y que esta cualidad no depende de la presencia o ausencia de Na+, además demuestran que el proceso favorecido es el intercambio de aminoácidos neutros (más Na+), desde el exterior por aminoácidos catiónicos en el interior