Tesis Doctorado
Translocación nuclear de la isoforma hepática de fructosa 1,6-bisfosfatasa
Autor
Slebe, Juan Carlos
Yáñez, Alejandro
Universidad Austral de Chile
Institución
Resumen
El hígado cumple una función clave en la homeostasis de la glucosa. Gluconeogénesis es la vía metabólica encargada de la producción endógena de glucosa y es regulada a nivel de 3 enzimas que catalizan reacciones irreversibles, entre ellas fructosa 1,6-bisfosfatasa (FBPasa), cuya actividad es modulada por los inhibidores AMP y f2,6Pz. Glucosa e insulina inducen la concentración nuclear de FBPasa en hepatocitos aislados de rata; sin embargo, FBPasa de hígado de rata poseé 25 residuos extra en su extremo e-terminal y 3 residuos de serina fosforilables que ninguna otra FBPasa presenta. En esta tesis se trabajó con la siguiente hipótesis: "La translocación nuclear en respuesta a estímulos metabólicos es un evento común para laisoforma hepática de FBPasa de distintas especies". En hígado de rata y ratón FBPasa se localiza exclusivamente en el citoplasma de los hepatocitos durante ayuno, y al re-alimentar se concentra en el núcleo y la periferia celular. Aldolasa B se comporta exactamente igual. Notablemente, en hígado de rata diabética FBPasa es incapaz de translocar al núcleo, señalando a insulina como el principal estímulo involucrado en su concentración nuclear. No existen diferencias significativas en los parámetros cinéticos de FBPasa de hígado de rata wt y una mutante que carece de los 25 residuos extra, sugiriendo que el extremo e-terminal no influye sobre su actividad o distribución subcelular. Además, FBPasa sólo está fosforilada en el citoplasma, indicando que su dinámica núcleo-citoplasma podría ser regulada por el estado de fosforilación. La expresión y zonación de FBPasa en hígado no varía durante la transición ayuno/re-alimentación; sin embargo, su distribución subcelular cambia drásticamente, sugiriendo que esta dinámica constituye un nuevo mecanismo de regulación de la actividad de la enzima y de la gluconeogénesis.