Prolactina activa la respuesta inmune innata en leucocitos de salmo salar y sparus aurata: rol de jak2/stat, nf-kb y pkc

Abstract

Prolactina (PRL), una hormona peptídica producida por la glándula pituitaria, juega un rol importante en la modulación del sistema inmune de vertebrados inferiores v _.. . ' . .. superiores. Con el propósito de investigar el efecto de PRL en la activación de fagocitos profesionales de peces se estimuló 'leucocitos .de cabeza de riñón, macrófagos purificados de dorada (Sparus aurata) y células SHK- l con varias concentraciones fisiológicas de PRL nativa de salmón y se analizó el estallido respiratorio y el perfil de expresión de citoquinas proinflamatorias. Los resultados muestran que PRL es capaz de inducir la producción de ROS y la expresión de IL-1 ~, TNF-a, p47phox, p67phox, gp91 phox e IRF-1. Todas las ' actividades de PRL fueron · bloqueadas con anticuerpo anti-PRL e inhibidores farmacológicos de las vías de señalización Jak/ Stat, PKC- y/o NF-KB. Adicionalmente, EMSA, HPLC/MS confirmó que Stat y NF-KB están involucrados en la activación de leucocitos de peces incubados con PRL. Finalmente, se clonó y secuenció los cDNAs codificantes de los componentes p47phox, p67phox y gp91phox del complejo NADPH oxida~a de salmón del Atlántico (Salmo salar) por medio de aproximaciones de clonación homóloga. Comparación de la secuencia aminoácida deducida, muestra que los componentes p47phox, p67phox y gp91phox de S. salar tiene un 51,45 y 68% de identidad con las subunidades de humanos, respect-ivamente. Adicionalmente, en este trabajo se muestra por primera vez que la activaciÓn de macrófagos en peces por PRL o lipopolisacárido promueve la activación de PKC la cual fosforila a p47phox, guiando a la activación de NADPH oxidasa y la .· generación de especies reactivas del oxígeno. Colectivamente, esta información identifica a PRL, como un regulador clave de la activación de fagocitos profesionales de peces y sugiere que el mecanismo de activación del complejo NADPH oxidasa está bien conservado desde peces hasta mamíferos.