Regulación del canal epitelial de sodió (enac) renal por receptores de prostaglandina e2 durante la activación ddel eje renina angiótensina aldosterona

Abstract

La prostaglandina E2(PGE2 ) es la principal prostaglandina sintetizada por las ciclooxigenasas a nivel renal. Evidencia experimental ha demostrado que la activación del sistema renina-angiotensina-aldosterona (RAAS) causa un aumento en la producción de PGE2 medular, la que actuaría amortiguando los efectos antinatriuréticos de la activación del RAAS. Experimentos en túbulos colectores aislados han demostrado que la activación de los receptores de PGE 2 , EP1 y EP3, modula negativamente la absorción de Na. En este segmento, el canal epitelial de sodio (ENaC) constituye la etapa limitante en la reabsorción de Na. En esta tesis se propuso como hipótesis que la activación de los receptores de PGE2, EP 1 y EP3, modula en forma negativa la expresión de ENaC durante la activación del RAAS. En una primera aproximación experimental, se implementó un cultivo primario de células principales de túbulos colectores de médula interna (IMCD) en las que se demostró la presencia de EP1 y EP3. Se evaluó el efecto de aldosterona (10 nM) sobre la abundancia del RNAm de aENaC en presencia de Sulprostone (1 p.M, agonista EP1/EP3) ó 17 Phenyl trinor (10 ViM, agonista EP1). La incubación de aldosterona más Sulprostone ó 17 Phenyl trinor, bloqueó el aumento de aENaC mediado por aldosterona, mientras que SC 19220 (10 jiM, antagonista EP1) fue capaz de anular la acción de ambos agonistas. Resultados similares se observaron en la abundancia proteica total de ctENaC. Experimentos de biotinilación demostraron que 17 Phenyl trinor inhibe la destinación de las tres subunidades en la membrana celular. Para evaluar los efectos de la activación crónica de EP 1 y EP3 en un contexto de activación del RAAS in vivo, ratas macho Sprague-Dawley fueron infundidas con angiotensina II (Ang II) (0,4 ig/kg/min) o Mg II + Sulprostone (20 g/kg/d) durante 5 días. La infusión de Mg II causó un aumento significativo en los niveles del RNAm y los niveles de proteicos de aENaC, sin cambios en P o y ENaC. Interesantemente, esta inducción de los niveles de aENaC mediada por la infusión de Mg II fue suprimida por el agonista EP1/EP3, Sulprostone, en la médula pero no en la corteza renal. El agonista específico EP1, 17 Phenyl trinor (30 g!kg/d), tuvo un efecto similar a Sulprostone. La infusión de ambos agonistas en ratas tratadas con Ang II también fue capaz de aumentar la excreción de Na' respecto a ratas normales. Análisis inmunohistoquímicos en tejidos normales demostraron sólo la presencia del receptor EPI en túbulos colectores medulares. Estos resultados en conjunto sugieren por primera vez que la activación específica del receptor EP 1 podría antagonizar la acción de aldosterona sobre la expresión de aENaC en la médula interna renal promoviendo la excreción de Na en un estado de activación del RAAS.