Tesis Doctorado
Caracterización fenotípica y genotípica de resistencia a antimicrobianos en cepas de salmonella spp, e.coli y enterococcus spp, aisladas de aves y cerdos
Autor
San Martín-Nuñez, Betty
Toro-Ugalde, Celicia
Universidad De Chile
Institución
Resumen
La resistencia en las cepas bacterianas aparece junto con el uso de los antimicrohianos. Hoy en
día el uso masivo de estos fármacos en el hombre, los animales y la agricultura ha transformado
este fenómeno en un problema creciente, que involucra cada día mayor número de cepas, nuevas
especies bacterianas y nuevos mecanismos. En este mismo sentido, las bacterias además son
particularmente eficientes en aumentar los efectos de la resistencia, no sólo por su habilidad de
multiplicarse rápidamente sino también, por su capacidad de transferir genes en forma horizontal.
El objetivo de este estudio fue caracterizar fenotípica y genotípicamente la resistencia a
antimicrobianos en cepas indicadoras E. col¡, Enterococcus spp y en cepas zoonóticas
S'ahnoneIIa spp aisladas desde animales sanos de importancia económica, como son las aves y
los cerdos. Se determinaron los porcentajes de resistencia frente a distintos antimicrobianos
mediante el método de dilución en placa y posteriormente se definieron los mecanismos
genéticos asociados a la resistencia en las distintas cepas bacterianas, para finalmente comparar
los perfiles de resistencia entre aves y cerdos.
En general las cepas bacterianas obtenidas tanto de aves como de cerdos mostraron altos niveles
de resistencia frente a la mayoría de antiniicrobianos analizados, siendo las drogas que
presentaron menor actividad in vitro tetraciclina, estreptomicina, quinolonas, fluoroquinolonas,
eritromicina, sulfametoxazol+trimetoprim y penicilina. Las cepas aisladas de aves presentaron
mayores porcentajes de resistencia frente a la familia de las quinolonas, mientras que las cepas
aisladas de cerdos presentaron mayores porcentajes de mu lti-resistenc ia.
Con respecto a los genes de resistencia presente en nuestro estudio, en las cepas de Sainionella
spp aisladas de aves resistentes a tetraciclina se observó un 13% de cepas positivas al gen le/A y
un 9% a 1dB mientras en los aislados de cerdos un 27% fueron positivas al gen !eL.4 y un 60% al
gen ieiB. En las cepas de E. cvii resistentes aisladas de aves un 33% presentó el gen felA y un
38% el gen 1dB: en los aislados de cerdos el 86% presentó el gen ieIB. En relación a las cepas
resistentes a estreptomicina nosotros identificamos el gen aadl en el 33% de las cepas de
Safinoiief/u ssp aisladas de aves y cii el 100% de los aislados de cerdos como también en el 100% de las cepas de E. coli aisladas de aves, mientras que el 95% de los aislados de cerdos
presentaron este gen. Para el caso de las cepas resistentes a sulfametoxazol+trimetoprim nosotros
encontramos cepas sólo cepas positivas al gen dhfrl. en el 100% de las cepas de SaInonellci spp
aisladas de cerdos y en las cepas de E. coli aisladas de aves y de cerdos. Para la resistencia frente
a eritronlicina. el gen más frecuente fue ermfl ya que más del 80% de las cepas de Enterococcus
spp resistentes de aves y cerdos presentaron este gen. Con respecto a los determinantes de
resistencia para quinolonas y fluoroquinolonas, en nuestras cepas tanto en los aislados de
Sainzonella spp como en los de E. coli de ambas poblaciones la resistencia se asoció
principalmente a la presencia de mutaciones eii los codones 81, 83 y 87 de la región QRDR del
gen gvrA.
Los integrones se han asociado a multi-resistencia y a transferencia de genes de resistencia en
forma horizontal, nosotros identificamos eii las cepas bacterianas la presencia de los genes de
integrasas ¡ii/II e 1,1112. Ninguna cepa de Sa1nonelIa spp aisladas de aves fue positiva a
integrasas, mientras que en los aislados de cerdos el 39% fue positivo a alguno de estos genes. En
las cepas de E. coli aisladas de aves un 25% fue positiva a mili o inii2, los aislados obtenidos de
cerdos presentaron una mayor portación de genes de integrasas con un 69% de cepas positivas.
Por otro lado, nosotros realizamos ensayos de conjugación para observar si los determinantes de
resistencia podrían ser transferidos a cepas receptoras, encontrando que 5 cepas fueron capaces
de transferir sus determinantes de resistencia por conjugación.
Los resultados de este estudio entregan información actualizada de la situación de la resistencia
bacteriana en cepas indicadoras y zoonóticas aisladas de dos especies animales productoras de
alimento de alto consumo en nuestro país. El uso de Tantimicrobianos en las distintas producciones
podría establecer las diferencias observadas en los patrones de resistencia encontrados.
Finalmente se puede señalar que los datos presentados en este trabajo podrían servir de base para
promover el desarrollo de un programa de monitoreo de la resistencia en medicina veterinaria.